KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 10 pdf

2. Phương pháp mẫu dò lạnh (cold probe)

Trước đây các phương pháp lai đều sử dụng mẫu dò đánh dấu

phóng xạ. Về sau thay vì chế tác và sử dụng những mẫu dò phóng xạ

người ta kết hợp kháng thể với enzyme và lợi dụng hoạt tính của enzyme

để phát màu cơ chất giúp phát hiện băng đặc hiệu, được gọi là phương

pháp mẫu dò lạnh. Nhìn chung phương pháp sử dụng mẫu dò lạnh có độ

phiền phức và mất thời gian tương tự phương pháp sử dụng mẫu dò phóng

xạ. Trong trường hợp này tính bổ sung giữa mẫu dò với DNA tế bào trở

nên giảm nên các bước rửa cần phải nhẹ nhàng. Nếu sử dụng các mẫu dò

phóng xạ thì việc kiểm tra chất lượng nền trong quá trình rửa thực hiện

được nhờ máy đo phóng xạ rất dễ dàng, và nếu rửa chưa đủ nên nền còn độ

phóng xạ cao thì tiếp tục rửa cho đến khi nền giảm xạ. Phương pháp mẫu

dò lạnh không có ưu điểm này, phải thực hiện chọn đến khi phát màu. Ví

dụ dưới đây mô tả phương pháp mẫu dò lạnh với probe của hãng

Amersham Life Science gọi là phương pháp ECL.

1 6 1