Tinh sạch protein - Phần 4

Tinh sạch protein

(tt)

V. Phân tách protein bằng điện

di trên gel

Để đánh giá quá trình tinh sạch

protein có hiệu quả hay không, ngoài

cách xác định hoạt tính đặc trưng của

protein có tăng lên sau mỗi bước tinh

sạch, còn một cách là làm hiện hình

các protein hiện diện trong mẫu sau

mỗi bước; điều này được thực hiện

nhờ kỹ thuật điện di.

V.1Điện di một chiều

Một phân tử có mang điện tích sẽ di

chuyển trong điện trường. Hiện tượng

này, được đặt tên là điện di, giúp

hướng tới một kỹ thuật rất mạnh để

phân tách protein và các đại phân tử

khác như DNA và RNA. Vận tốc di

chuyển (v) của một protein (hay bất

kỳ phân tử nào) trong điện trường phụ

thuộc vào lực điện trường (E), điện

tích thực của protein (z) và hệ số ma

sát (f)

Lực điện Ez kéo phân tử mang điện

tích tới điện cực trái dấu bị cản trở bởi

lực kéo của độ nhớt fv tăng lên do sự

ma sát giữa phân tử đang chuyển

động với môi trường. Lực ma sát phụ

thuộc vào cả khối lượng, hình dạng

của phân tử đang di chuyển lẫn độ