Nghiên Cứu Phân Lập Và Tuyển Chọn Chủng Vi Khuẩn Lactic Có Một Số Đặc Tính Dùng Để Định Hướng Ứng Dụng Sản Xuất Sản Phẩm Probiotic

LỜI CẢM ƠN

Trên thực tế không có sự thành công nào mà không gắn liền với những sự

hỗ trợ, giúp đỡ dù ít hay nhiều, dù trực tiếp hay gián tiếp của ngƣời khác. Trong

suốt thời gian từ khi bắt đầu học tập tại trƣờng đến nay, em đã nhận đƣợc rất

nhiều sự quan tâm, giúp đỡ của quý Thầy Cô, gia đình và bạn bè. Với lòng biết

ơn sâu sắc nhất, em xin gửi đến các Cô ở Bộ môn Vi sinh - Hóa sinh thuộc Viện

Công nghệ Sinh học - Trƣờng Đại học Lâm Nghiệp đã cùng với tri thức và tâm

huyết của mình để truyền đạt vốn kiến thức quý báu cho chúng em trong suốt

thời gian học tập tại Trƣờng.

Và đặc biệt em cũng xin chân thành cảm ơn TS. Nguyễn Nhƣ Ngọc đã

nhiệt tình hƣớng dẫn em hoàn thành tốt báo cáo khóa luận tốt nghiệp này.

Nếu không có những lời hƣớng dẫn, dạy bảo của các Thầy Cô thì em nghĩ

bài báo cáo khóa luận tốt nghiệp này của em rất khó có thể hoàn thiện đƣợc. Một

lần nữa, em xin chân thành cảm ơn thầy cô. Bƣớc đầu đi vào thực tế của em còn

hạn chế và còn nhiều bỡ ngỡ, trình độ lý luận cũng nhƣ kinh nghiệm thực tiễn

còn hạn chế. Do vậy, không tránh khỏi những thiếu sót, em rất mong nhận đƣợc

những ý kiến đóng góp quý báu của quý Thầy Cô để kiến thức của em trong lĩnh

vực này đƣợc hoàn thiện hơn, giúp em học hỏi thêm đƣợc nhiều kinh nghiệm và

sẽ làm hành trang tốt cho công việc sau này.

Em xin chân thành cảm ơn!

Hà nội, ngày 8 tháng 5 năm 2018

Sinh viên thực hiện

Nguyễn Thị Lý

MỤC LỤC

LỜI CẢM ƠN

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT

DANH MỤC CÁC BẢNG

DANH MỤC CÁC HÌNH

ĐẶT VẤN ĐỀ....................................................................................................... 1

Chƣơng 1: TỔNG QUAN ..................................................................................... 3

1.1 Vi khuẩn Lactic (LAB) ................................................................................... 3

1.1.1 Khái quát về nhóm vi khuẩn sinh Lactic...................................................... 3

1.1.2. Phân loại vi khuẩn lactic ............................................................................. 4

1.1.3 Các yếu tố ảnh hƣởng đến sự sinh trƣởng của vi khuẩn lactic .................... 7

1.1.4 Ứng dụng của vi khuẩn lactic....................................................................... 9

1.2 Probiotic ........................................................................................................ 10

1.2.1 Khái niệm Probiotic ................................................................................... 10

1.2.2 Vai trò của Probiotic .................................................................................. 11

Chƣơng 2: MỤC TIÊU – NÔI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU.. 16

2.1 Mục tiêu nghiên cứu...................................................................................... 16

2.2 Nội dung nghiên cứu..................................................................................... 16

2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu............................................................................... 16

2.3.1 Nguyên liệu ................................................................................................ 16

2.3.2 Hóa chất và Thiết bị ................................................................................... 16

2.3.3 Các phƣơng pháp nghiên cứu..................................................................... 18

Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .......................................................... 25

3.1 Kết quả phân lập và thuần khiết giống.......................................................... 25

3.2 Kết quả khả năng sinh axit lactic .................................................................. 27

3.3 Kết quả đặc điểm sinh hoá của các chủng đƣợc chọn lọc............................. 28

3.4 Kết quả kiểm tra khả năng chịu nhiệt ........................................................... 30

3.5 Kết quả kiểm tra khả năng chịu pH thấp....................................................... 31

3.6 Kết quả khả năng sinh chất kháng khuẩn...................................................... 32

3.7 Kết quả thử hoạt tính enzyme ngoại bào....................................................... 36

3.8 Kết quả thử hoạt tính kháng kháng sinh........................................................ 38

Chƣơng 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .......................................................... 41

4.1 Kết luận ......................................................................................................... 41

4.2 Kiến nghị....................................................................................................... 41

TÀI LIỆU THAM KHẢO

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT

LAB (Lactic Acid Bacteria) Vi khuẩn lactic

MRS de Man, Rogosa, Sharp

BC (Bacterial Cellulose) Cellulose vi khuẩn

kDa kiloDalton

sp. (species) Loài

GRAS Generally Recognized As Safe (Đƣợc công

nhận chung là an toàn)

aa Acid amino

VSV Vi sinh vật

VK Vi khuẩn

NCCLS National Committee for Clinical Laboratory

Standards

LB Lysogeny Broth (môi trƣờng cơ bản để nuôi cấy

vi khuẩn)

WHO World Health Organization (Tổ chức Y tế thế

giới)

FAO Food and Agriculture Organization of the

United Nations (Tổ chức Lƣơng thực và Nông

nghiệp Liên Hiệp Quốc)

DANH MỤC CÁC BẢNG

Bảng 2.1 Danh sách máy móc thiết bị sử dụng................................................... 18

Bảng 3.1: Kết quả phân lập vi khuẩn LAB......................................................... 26

Bảng 3.2: Kết quả khả năng sinh axit của các chủng vi khuẩn.......................... 27

Bảng 3.3: Kết quả thử nghiệm các phản ứng Calatase và nhuộm Gram ............ 29

Bảng 3.4: Kết quả mật độ vi khuẩn cfu /ml với sự ảnh hƣởng của nhiệt dộ ...... 31

Bảng 3.5: Kết quả mật độ vi khuẩn cfu/ml với sự ảnh hƣởng của pH................ 32

Bảng 3.6: Kết quả thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn của các chủng vi khuẩn 33

Bảng 3.7: Hoạt tính enzyme ngoại bào ............................................................... 36

Bảng 3.8: Hoạt tính kháng kháng sinh Tetracylin .............................................. 38

Bảng 3.9: Hoạt tính kháng kháng sinh Streptomycin ......................................... 39

Bảng 3.10: Hoạt tính kháng kháng sinh Gentamycin ........................................ 39