Giáo trình DNA tái tổ hợp part 7 pps

Công nghệ DNA tái tổ hợp 106

Cosmid đầu cos (chương 4

. Sau khi

x vào đầu

cos tiếp

chèn

40-45 kb, khả năng của phage .

4. Các BAC vector

Các BAC vector hiện nay được xem như công cụ hữu hiệu nhất trong

việc xây dựng các thư viện genome, do chúng có các ưu điểm sau:

- Có khả năng gắn các đại phân tử DNA 100-300 kb.

- Ít hình thành thể khảm (chimera).

- Có hiệu quả cao trong tạo dòng và thu hồi DNA.

- Duy trì sự ổn định của các DNA được gắn vào vector.

Nhờ những ưu điểm trên nên hệ thống BAC thường được dùng để xây

dựng bản đồ vật lý. DNA có thể dễ dàng được phân lập trong các dòng

BAC, các dòng phân lập được từ lai khuẩn lạc sẽ được kiểm tra bằng kỹ

thuật DNA fingerprinting thông qua phản ứng cắt của enzyme hạn chế

HindIII. Kỹ thuật fingerprinting cung cấp cho chúng ta thông tin về những

phần trùng lặp (overlapping) và không trùng lặp của BAC. Nhờ vậy, có thể

hoàn thiện bản đồ vật lý có chất lượng cao, phục vụ cho việc phân tích

genome và chuyển nạp gen sau này.

5. Các YAC vector

Các YAC là các nhiễm sắc thể nhân tạo của nấm men và cũng là các

vector tạo dòng được sử dụng trong phân tích genome. Chúng mang các

đoạn telomere (phần cuối) và centromere (phần tâm) của một nhiễm sắc thể

trong nấm men. Cả hai nhân tố này cần thiết cho sự tái bản của nhiễm sắc

thể trong các tế bào nấm men: nếu không có telomere, thì sau đó các đầu

của nhiễm sắc thể có khả năng bị rời ra hoặc gắn vào các nhiễm sắc thể

khác. Nếu không có centromere, thì sau đó các nhiễm sắc thể mới được tạo