Tuyển Chọn Vi Khuẩn Azotobacter Có Khả Năng Cố Định Nitơ Phân Giải Phosphate Khó Tan Và Sinh Tổng Hợp Iaa

i

LỜI CẢM ƠN

Trong quá trình nghiên cứu tại Viện Công nghệ Sinh học Lâm nghiệp

tôi vô cùng biết ơn sự quan tâm, giúp đỡ của nhiều cá nhân, tập thể.

Nhân dịp hoàn thành khoá luận tốt nghiệp, tôi xin chân thành cám ơn

Ban giám hiệu nhà trƣờng, Ban lãnh đạo Viện Công nghệ Sinh học Lâm

nghiệp đã cho phép và tạo điều kiện thuận lợi để tôi đƣợc nghiên cứu tại Viện.

Tôi xin chân thành cám ơn các thầy cô cùng cán bộ công nhân viên trong bộ

môn Công nghệ Hoá sinh – Vi sinh; Viện công nghệ sinh học Lâm nghiệp đã

tận tình giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu.

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới ThS. Nguyễn Thị Thu Hằng đã

tận tình giúp đỡ và hƣớng dẫn tôi trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu và

hoàn thành khoá luận tốt nghiệp.

Mặc dù tôi đã có những cố gắng và nỗ lực rất nhiều xong do kiến thức

còn hạn chế nên không tránh khỏi những sai sót rất mong nhận đƣợc sự đóng

góp quý báu của thầy cô để chuyên đề đƣợc hoàn thiện hơn.

Chúng tôi xin chân thành cảm ơn!

Hà Nội, ngày tháng năm 2018

ii

MỤC LỤC

LỜI CẢM ƠN ....................................................................................................i

MỤC LỤC.........................................................................................................ii

KÝ HIỆU VÀ VIẾT TẮT................................................................................iv

DANH MỤC CÁC BẢNG................................................................................ v

DANH MỤC CÁC HÌNH................................................................................vi

ĐẶT VẤN ĐỀ................................................................................................... 1

CHƢƠNG 1 TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU.................................... 2

1.1. Tổng quan về vi khuẩn cố định nitơ........................................................... 2

1.1.1. Nitơ và quá trình cố định nitơ ................................................................. 2

1.1.2. Vi khuẩn cố định nitơ.............................................................................. 3

1.2. Tổng quan về vi khuẩn Azotobacter ........................................................ 10

1.2.1. Một số đặc điểm sinh học của vi khuẩn Azotobacter ........................... 10

1.2.2. Đặc tính sinh lý, sinh hóa...................................................................... 11

1.2.3. Ảnh hƣởng các nhân tố sinh thái đến sự sinh trƣởng và phát triển của vi

khuẩn Azotobacter........................................................................................... 11

1.3. Tình hình nghiên cứu về vi khuẩn cố định nitơ ứng dụng trong sản xuất

phân bón vi sinh .............................................................................................. 13

1.3.1. Tình hình nghiên cứu trên thế giới........................................................ 13

1.3.2. Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam ........................................................ 15

CHƢƠNG 2 MỤC TIÊU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU..17

2.1. Mục tiêu nghiên cứu................................................................................. 17

2.2. Nội dung nghiên cứu................................................................................ 17

2.3. Vật liệu nghiên cứu .................................................................................. 17

2.4. Các môi trƣờng sử dụng trong nghiên cứu .............................................. 18

2.5. Phƣơng pháp nghiên cứu.......................................................................... 19

2.5.1. Phƣơng pháp thu thập mẫu.................................................................... 19

2.5.2. Phƣơng pháp pha loãng mẫu và phân lập các chủng vi sinh vật .......... 19

2.5.3. Phƣơng pháp nhuộm Gram ................................................................... 20

iii

2.5.4. Tuyển chọn chủng Azotobacter có khả năng cố định nitơ.................... 21

2.5.5. Xác định khả năng tổng hợp IAA của các chủng Azotobacter............. 23

2.5.6. Xác định khả năng phân giải phosphate khó tan của các chủng

Azotobacter...................................................................................................... 24

2.5.7. Phƣơng pháp xử lý số liệu thống kê...................................................... 25

CHƢƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN................................................... 26

3.1. Kết quả phân lập các chủng Azotobacter có khả năng cố định nitơ ........ 26

3.2. Tuyển chọn các chủng Azotobacter......................................................... 30

3.2.1. Tuyển chọn các chủng Azotobacter có khả năng cố định nittơ cao...... 30

3.2.2. Xác định khả năng sinh tổng hợp IAA ................................................. 32

3.2.3. Xác định khả năng phân giải phosphate khó tan................................... 34

CHƢƠNG 4 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ................................................... 36

4.1. Kết luận .................................................................................................... 36

4.2. Kiến nghị.................................................................................................. 36

TÀI LIỆU THAM KHẢO

iv

KÝ HIỆU VÀ VIẾT TẮT

Ký hiệu chữ viết tắt Viết đầy đủ

A Adenosine diphosphate

ATP Adenosine triphosphate

BNF Biological nitrogen fixation

CMC Carboxyl methyl cellulose

CNSH Công nghệ sinh học

FAD Flavin adenine dinucleotide

Fd Feredocine

G Gram

Kg Killogram

L Lít

Mg Milligram

Ml Milliliter

Mm Millimeter

OD Optical density

N Nitơ

PHB Polyhydroxybutyrate

VSV Vi sinh vật

µg Microgram

µm Micrometres