Tài liệu KHẢO SÁT HOẠT TÍNH HỆ ENZYME AMYLASE TỪ 3 CHỦNG TRICHODERMA pptx

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HCM

BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC

***OOO***

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

KHẢO SÁT HOẠT TÍNH HỆ ENZYME AMYLASE

TỪ 3 CHỦNG TRICHODERMA

NGÀNH HỌC: CÔNG NGHỆ SINH HỌC

NIÊN KHÓA: 2002-2006

SINH VIÊN THỰC HIỆN: NGUYỄN NHƢ HIẾN

Thành phố Hồ Chí Minh

tháng 8/2006

2

LỜI CẢM TẠ

Em xin chân thành cảm tạ:

 Ban Giám Hiệu Trƣờng Đại Học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh, Ban chủ

nhiệm Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học, cùng tất cả quý thầy cô đã truyền đạt kiến

thức cho em trong suốt quá trình học tại trƣờng.

 Ths. Vƣơng thị Việt Hoa đã hết lòng hƣớng dẫn, giúp đỡ em trong suốt thời

gian thực tập tốt nghiệp.

 Cô Trƣơng Phƣớc Thiên Hoàng đã tận tình giúp đỡ em trong quá trình nhận và

thực hiện đề tài.

 Ban Giám Đốc Trung Tâm Phân Tích Thí Nghiệm Hóa Sinh - Trƣờng Đại Học

Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh.

 Ban chủ nhiệm, Thầy Cô khoa Công Nghệ Thực Phẩm.

 Các Anh Chị tại Trung Tâm Phân Tích Thí Nghiệm Hóa Sinh đã tận tình giúp

đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho em trong thời gian thực tập tốt nghiệp.

 Các bạn bè của lớp công nghệ sinh học khóa 28 đã chia sẻ cùng tôi những vui

buồn trong thời gian học cũng nhƣ hết lòng hỗ trợ, giúp đỡ tôi trong thời gian

thực tập.

 Các bạn bè ngoài lớp đã động viên, giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập và

thực tập tốt nghiệp.

Sinh viên thực hiện

Nguyễn nhƣ Hiến

3

TÓM TẮT

 Đề tài “KHẢO SÁT HOẠT TÍNH HỆ ENZYME AMYLASE TỪ 3 CHỦNG

TRICHODERMA” thực hiện bởi sinh viên Nguyễn nhƣ Hiến, lớp DH02SH￾Khoa CNSH-Trƣờng Đại Học Nông Lâm dƣới sự hƣớng dẫn bởi Th.s Vƣơng

Thị Việt Hoa.

 Thời gian và địa điểm: Đề tài đƣợc thực hiện từ tháng 3/2006 đến tháng 6/2006,

Tại Phòng Vi Sinh - khoa Công Nghệ Thực Phẩm - trƣờng Đại Học Nông Lâm.

 Đề tài đƣợc thực hiện trên đối tƣợng vi nấm Trichoderm. sp gồm 3 chủng D13,

D14, D16. Chúng là vi nấm phân bố rộng rãi trong đất, có nhiều hệ enzyme

(cellulase, amylase…). Do đó, chúng tôi tiến hành khảo sát và đánh giá hoạt lực

hệ enzyme amylase của các chủng này (đƣợc cung cấp bởi phòng thí nghiệm

trƣờng Đại Học Khoa Học Tự Nhiên), để từ đó bổ sung vào các ứng dụng: công

nghệ thực phẩm, công nghệ dệt, xử lý môi trƣờng…đáng chú ý là trong lĩnh vực

bổ sung vào trong thức ăn gia súc và các dạng phân bón sinh học.

 Những kết quả đạt đƣợc.

Chọn ra đƣợc chủng Trichoderma có hoạt tính hệ enzyme amylase phân giải

cao.

Khảo sát đƣợc các yếu tố ảnh hƣởng đến hệ enzyme amylase tách chiết từ môi

trƣờng nuôi cấy (thời gian, nhiệt độ, pH).

4

MỤC LỤC

NỘI DUNG TRANG

Trang tựa

Lời cảm tạ .......................................................................................................................2

Tóm tắt.............................................................................................................................3

Mục lục ...........................................................................................................................4

Danh sách các hình..........................................................................................................6

...........................................................................................................................................

Danh sách các bảng ........................................................................................................7

Danh sách các biểu đồ ....................................................................................................8

I. MỞ ĐẦU......................................................................................................................9

II. Tổng quan tài liệu. ....................................................................................................10

2.1. Giới thiệu về tinh bột..............................................................................................10

2.2. Quá trình thuỷ phân tinh bột...................................................................................10

2.3. Giới thiệu về nấm Trichoderma..............................................................................17

2.3.1. Phân loại-Đặc điểm về hình thái. ........................................................................17

2.3.2. Đặc điểm về sinh lý, sinh hoá..............................................................................18

III. VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP...........................................................................19

3.1. Vật liệu ...................................................................................................................19

3.2. Phƣơng pháp...........................................................................................................21

3.2.1. Phƣơng pháp định tính và sơ bộ định lƣợng hoạt độ enzyme amylase

bằng cách đo đƣờng kính vòng phân giải......................................................................21

3.2.2 Phƣơng pháp nuôi cấy Trichoderma và tách chiết hệ enzyme amylase

từ môi trƣờng nuôi cấy. ................................................................................................22

3.2.3. Phƣơng pháp khảo sát động học hệ enzyme amylase .........................................22

3.2.4. Phƣơng pháp khảo sát ảnh hƣởng của pH đối vối enzyme amylase. ..................23

3.2.5. Phƣơng pháp khảo sát ảnh hƣởng của nhiệt độ đối vối enzyme amylase ...........24

3.2.6. Phƣơng phàp xác định hoạt tính hệ enzyme amylase.( Phƣơng pháp Heinkel ). 24

5

IV. KẾT QUẢ................................................................................................................28

4.1. Kết quả đếm số lƣợng bào tử bằng buồng đếm hồng cầu. .....................................28

4.2. Kết quả định tính và sơ bộ định lƣợng hoạt độ enzyme amylase bằng cách đo

đƣờng kính vòng phân giải............................................................................................29

4.3. Kết quả khảo sát động học enzyme amylase..........................................................31

4.4. Kết quả khảo sát ảnh hƣởng của nhiệt độ đối với enzyme amylase trên chủng

D13 ................................................................................................................................39

4.5. Kết quả khảo sát ảnh hƣởng của pH đối với enzyme amylase trên chủng D13. ...41

V. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ......................................................................................43

VI. TÀI LIỆU THAM KHẢO ......................................................................................44

PHỤ LỤC ......................................................................................................................45