Tài liệu Chương 2: CÁC KỸ THUẬT NỀN CỦA CNSH HIỆN ĐẠI (tiếp theo) doc

LOGO

Chương 2: CÁC KỸ THUẬT

NỀN CỦA CNSH HIỆN ĐẠI

(tiếp theo)

Nguyen Thi Viet Anh

www.themegallery.com

Nội dung

1. Các kỹ thuật chính dùng trong công nghệ DNA tái tổ hợp

1.2. Các enzymdùng trong công nghệ DNA tái tổ hợp

1.3. Các vector nhân dòng dùng trong công nghệ DNA tái tổ hợp

1.1. Khái niệm

1.4. Nhân dòng gen (gene cloning)

2. Các kỹ thuật chính sử dụng trong phân tích DNA

2.1. Kỹ thuật chiết tách DNA và RNA

2.2. Kỹ thuật tạo ngân hàng cDNA

2.3. Phương pháp PCR

2.4. Kỹ thuật xác định trình tự DNA

2.5. Kỹ thuật RFLP (dựa vào lai DNA/DNA)

2.6. Các kỹ thuật xác định tính đa hình DNA dựa trên PCR (AFLP, SSR)

1.5. Chọn lọc, tạo dòng và sự biểu hiện của gen

2.7. Genomic và proteomic

www.themegallery.com

 Ngân hàng bộ gen:

 Thư viện DNA từ bộ gen (lắc cơ học, RE);

 Khái niệm ngân hàng bộ gen (Bank of genomic DNA):

• Đoạn DNA được tách dòng (khác nhau do tế bào, bộ gen, RE,…);

• Bao gồm exon và intron;

• VD: ngân hàng bộ gen của vi khuẩn;

• tập hợp tất cả các trình tự DNA cấu thành bộ gen và đã được tách

dòng trong tế bào chủ;

• Đầu tiên DNA 300.000-400.000 bp gắn vào YAC hoặc BAC, cắt

đoạn nhỏ trung bình 30.000-40.000 bp gắn vào cosmid, cuối cùng

là các đoạn trung bình 4.000 bp gắn vào plasmid để giải kí tự chuỗi.

2. Các kỹ thuật chính sử

dụng trong phân tích DNA

www.themegallery.com

2. Các kỹ thuật chính sử

dụng trong phân tích DNA

Bước 1: Dùng enzyme cắt giới hạn

Bước 2: DNA bị cắt thành nhiều

đoạn khác nhau

Bước 3: đoạn DNA

được đưa vào vector