Sinh học phân tử - P5

Sinh học phân tử 95

Chương 5

Phiên mã

Phiên mã là quá trình tổng hợp RNA từ khuôn mẫu DNA. Quá trình

này về phương diện hóa học và enzyme rất giống với quá trình tái bản DNA.

Cả hai đều liên quan đến các enzyme tổng hợp một chuỗi nucleic acid mới

bổ sung với khuôn mẫu DNA. Tất nhiên, hai quá trình này có những khác

biệt quan trọng, mà đáng chú ý nhất là chuỗi mới trong quá trình phiên mã

được tạo thành từ các ribonucleotide thay vì các deoxyribonucleotide. Các

nguyên tắc cơ bản của quá trình phiên mã được thiết lập dựa vào nghiên cứu

trên prokaryote (E. coli) nhưng dường như các nguyên tắc này cũng có tính

phổ biến cho cả eukaryote. Tuy nhiên, do sự khác biệt về cấu trúc genome

và hệ thống enzyme nên sự phiên mã ở prokaryote và eukaryote cũng có

những đặc trưng nhất định.

I. Các đặc điểm cơ bản của quá trình phiên mã

1. Sự phiên mã tạo ra RNA bổ sung với một sợi DNA

Các ribonucleotide nối tiếp của RNA được xác định dựa trên nguyên

tắc bổ sung với các nucleotide trên DNA khuôn mẫu. Khi sự bắt cặp chính

xác xảy ra, ribonucleotide tiếp theo được liên kết đồng hóa trị với chuỗi

RNA đang hình thành nhờ phản ứng có enzyme xúc tác. Như vậy, sản phẩm

phiên mã được kéo dài từng ribonucleotide một và bổ sung chính xác với

sợi DNA được dùng làm khuôn mẫu.

Quá trình phiên mã dù có tính chính xác cao nhưng vẫn kém hơn

nhiều so với quá trình tái bản DNA (tỷ lệ mắc lỗi là 1/10.000 nucleotide so

với 1/10.000.000 trong tái bản). Đó là do sự thiếu một cơ chế sửa sai hữu

hiệu, mặc dù trong quá trình tổng hợp RNA cũng có hai dạng sửa sai tồn tại.

Tuy nhiên, vì các RNA được phiên mã không bao giờ được sao chép lại nên

các sai sót xảy ra không ảnh hưởng đến việc truyền đạt thông tin cho thế hệ

sau.

Sinh học phân tử 96

2. Sự phiên mã là một phản ứng enzyme

Những enzyme chịu trách nhiệm cho quá trình phiên mã ở cả tế bào

prokaryote và eukaryote đều được gọi là RNA polymerase phụ thuộc DNA

(DNA-dependent RNA polymerase), gọi tắt là RNA polymerase.

RNA polymerase xúc tác hình thành các cầu nối phospho-diester để

nối các ribonucleotide thành một chuỗi thẳng. Enzyme dịch chuyển từng

bước dọc theo DNA khuôn mẫu và kéo dài chuỗi RNA theo hướng từ

5’ 3’, nghĩa là các ribonucleotide được thêm vào đầu 3’ của chuỗi RNA

đang hình thành. Các cơ chất được sử dụng để tổng hợp RNA là ATP, GTP,

CTP và UTP. Cũng giống như trong sự tái bản DNA, năng lượng cho phản

ứng được cung cấp từ sự thủy phân các cầu nối giàu năng lượng của các cơ

chất nói trên.

3. Sự phiên mã chỉ sao chép chọn lọc một số phần của genome và tạo ra

nhiều bản sao

Sự lựa chọn vùng nào để phiên mã không phải xảy ra ngẫu nhiên. Mỗi

vùng phiên mã điển hình bao gồm một hoặc nhiều gen, có những trình tự

DNA đặc hiệu hướng dẫn khởi đầu và kết thúc phiên mã.

Đối với một vùng được chọn phiên mã, có thể có một đến hàng trăm

thậm chí cả nghìn bản sao RNA được tạo ra. Sự tổng hợp phân tử RNA sau

được bắt đầu trước khi phân tử RNA trước hoàn thành. Từ một gen đơn độc,

trong vòng một giờ có thể tổng hợp được hơn một nghìn phân tử RNA (đối

với eukaryote).

Sự lựa chọn vùng nào để phiên mã và mức độ phiên mã đều được điều

hòa. Vì vậy, trong những tế bào khác nhau hoặc trong cùng một tế bào

nhưng ở những thời điểm khác nhau sẽ có những nhóm gen khác nhau được

phiên mã.

4. Chỉ một trong hai sợi đơn của phân tử DNA được dùng làm khuôn mẫu

Việc gắn của RNA polymerase vào promoter của gen sẽ quyết định

việc lựa chọn sợi nào trong hai sợi đơn của DNA làm khuôn mẫu. Promoter,

ngoài việc mang vị trí gắn RNA polymerase còn chứa đựng thông tin xác

định sợi nào trong hai sợi đơn của DNA được phiên mã và xác định vị trí

bắt đầu phiên mã.