Phân lập vi sinh vật sản xuất phytase trong đất tại huyện Phú Hòa, tỉnh Phú Yên

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƢỜNG ĐẠI HỌC QUY NHƠN

ĐẶNG THỊ MỸ HẠNH

PHÂN LẬP VI SINH VẬT SẢN XUẤT PHYTASE

TRONG ĐẤT TẠI HUYỆN PHÚ HÒA,

TỈNH PHÚ YÊN

Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm

Mã số: 8420114

Ngƣời hƣớng dẫn: PGS. TS. Nguyễn Thị Mộng Điệp

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan các số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này

là trung thực, khách quan, phù hợp với thực tiễn của Việt Nam và chưa được

sử dụng trong bảo vệ bất kì một học vị nào.

Tôi xin cam đoan mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện hoàn thành luận

văn đã được cảm ơn và mọi thông tin trích dẫn đều được chỉ rõ nguồn gốc.

Tôi xin cam đoan!

Học viên cao học

Đặng Thị Mỹ Hạnh

LỜI CẢM ƠN

Trước tiên, tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu, Quý Thầy, Cô

giảng viên Trường Đại học Quy Nhơn đã tạo điều kiện cũng như truyền thụ

những kiến thức quý báu để tôi hoàn thành khóa học.

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc nhất đến PGS.TS. Nguyễn Thị

Mộng Điệp - người thầy đầy tâm huyết đã luôn tận tình giúp đỡ, hướng dẫn

tôi trong cả quá trình nghiên cứu khoa học và tạo mọi điều kiện thuận lợi

nhất để tôi hoàn thành luận văn này.

Tôi xin chân thành cảm ơn cán bộ, nhân viên quản lý phòng thực hành

các môn Khoa học Tự nhiên Trường Đại học Quy Nhơn và nhân viên bảo vệ

Trường THPT Trần Quốc Tuấn đã tạo điều cho tôi rất nhiều trong suốt quá

trình nghiên cứu tại Trường.

Tôi xin gửi lời cảm ơn đến các gia đình: ông Đào Bước, ông Đào Đức

Đậm, ông Phan Thanh Thất và bà Lê Thi Bông đã hỗ trợ cho tôi trong quá

trình lấy các mẫu đất để nghiên cứu.

Cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn đến người thân trong gia đình, bạn

bè, đồng nghiệp cùng tập thể lớp Sinh học thực nghiệm K23 đã luôn động

viên và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài này!

Bình Định, tháng 9 năm 2022

Học viên

Đặng Thị Mỹ Hạnh

MỤC LỤC

LỜI CAM ĐOAN

LỜI CẢM ƠN

DANH MỤC CÁC BẢNG

DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH

MỞ ĐẦU ...........................................................................................................1

1. Lý do chọn đề tài.......................................................................................1

2. Mục tiêu nghiên cứu .................................................................................2

3. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu ............................................................3

4. Nội dung nghiên cứu.................................................................................3

5. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài..................................................4

CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU.........................................................5

1.1. Tổng quan về enzyme phytase...............................................................5

1.1.1. Khái niệm.......................................................................................5

1.1.2. Khối lượng phân tử........................................................................5

1.1.3. Phân loại........................................................................................6

1.1.4. Cơ chế hoạt động của enzyme phytase ..........................................6

1.1.5. Hoạt tính phytase...........................................................................7

1.1.6. Tìm năng ứng dụng của enzyme phytase .......................................9

1.2. Nguồn phytase trong tự nhiên..............................................................13

1.2.1. Phytase ở vi sinh vật ....................................................................13

1.2.2. Phytase ở thực vật........................................................................14

1.2.3. Phytase ở động vật và con người.................................................15

1.3. Tình hình nghiên cứu enzyme phytase trên thế giới và Việt Nam......16

1.3.1. Tình hình nghiên cứu trên thế giới ..............................................16

1.3.2. Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam................................................18

CHƢƠNG 2. ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU..........21

2.1. Đối tượng nghiên cứu: .........................................................................21

2.2. Địa điểm và thời gian nghiên cứu........................................................21

2.3. Phương pháp nghiên cứu .....................................................................21

2.3.1. Phương pháp thu mẫu..................................................................21

2.3.2. Phương pháp đo pH của đất........................................................22

2.3.3. Phương pháp xác định độ ẩm đất..............................................22

2.3.4. Phương pháp phân lập vi sinh vật có khả năng sinh phytase

ngoại bào ....................................................................................................23

2.3.5. Phương pháp xác định số lượng tế bào vi sinh vật .....................24

2.3.6. Phương pháp xác định điều kiện sinh trưởng tối ưu cho chủng vi

sinh vật sinh phytase ngoại bào. ................................................................25

2.3.7. Phương pháp giữ giống vi sinh vật..............................................25

2.3.8. Phương pháp ứng dụng dịch nuôi cấy của các chủng nấm mốc

tuyển chọn đến giai đoạn đầu của sự sinh trưởng và phát triển cây lúa

(Oryza stativa L.)........................................................................................25

2.3.9. Phương pháp xử lý các số liệu.....................................................26

CHƢƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN ...................................................27

3.1. Sự phân bố các chủng vi sinh vật sinh phytase phân lập từ đất tại

huyện Phú Hòa, tỉnh Phú Yên..........................................................................27

3.2. Thành phần các chủng vi sinh vật sinh phytase phân lập từ đất tại

huyện Phú Hòa, tỉnh Phú Yên..........................................................................28

3.3. Tuyển chọn các chủng vi sinh vật sinh phytase mạnh trong đất tại

huyện Phú Hòa, tỉnh Phú Yên..........................................................................31

3.4. Xác định điều kiện sinh trưởng tối ưu cho chủng vi sinh vật sinh

phytase ngoại bào.............................................................................................35

3.5. Hoạt độ enzyme phytase qua các thời điểm nuôi cấy của các chủng

nấm sợi và vi khuẩn tuyển chọn.......................................................................41

3.6. Thăm dò ảnh hưởng của dịch nuôi cấy các chủng vi sinh vật tuyển

chọn đến giai đoạn đầu của sự sinh trưởng và phát triển cây lúa (Oryza stativa

L.) .....................................................................................................................43

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ......................................................................48

1. Kết luận ...................................................................................................48

2. Kiến nghị.................................................................................................50

DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC

QUYẾT ĐỊNH GIAO ĐỀ TÀI LUẬN VĂN THẠC SĨ (BẢN SAO)

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT

STT Từ viết tắt Từ đầy đủ

1 ĐC Đối chứng

2 IP Inositol phosphate

3 TN Thí nghiệm

4 VSV Vi sinh vật