Phân Lập Vi Khuẩn Bacillus Megaterium Có Tiềm Năng Ứng Dụng Trong Sản Xuất Chế Phẩm Phân Bón Sinh Học

i

LỜI CẢM ƠN

Để hoàn thành đề tài khóa luận này, tôi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh

đạo Viện Công nghệ sinh học Lâm nghiệp đã cho phép và tạo điều kiện thuận

lợi để tôi thực tập tại Viện. Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy, cô giáo trong

Viện Công nghệ sinh học Lâm nghiệp đã tận tình truyền đạt kiến thức cho tôi

trong suốt 4 năm học tập tại trƣờng. Với vốn kiến thức đƣợc tiếp thu trong quá

trình học không chỉ là nền tảng cho quá trình nghiên cứu đề tài mà còn là hành

trang quý báu để tôi bƣớc vào đời một cách vững chắc và tự tin.

Tôi xin đƣợc bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Ths. Nguyễn Thị Thu Hằng

giảng viên Viện CNSH Lâm nghiệp đã tận tình định hƣớng và hƣớng dẫn tôi

trong suốt quá trình hoàn thành đề tài nghiên cứu khoa học.

Trong quá trình thực hiện và hoàn thành đề tài nghiên cứu khoa học do

thời gian và kiến thức còn hạn chế nên không thể tránh khỏi những thiếu sót rất

mong nhận đƣợc sự đóng góp ý kiến, chỉ bảo tận tình của quý thầy, cô để đề tài

khóa luận của tôi đƣợc hoàn thiện hơn.

Tôi xin chân thành cảm ơn!

Giáo viên hƣớng dẫn Sinh viên thực hiện

Ths. Nguyễn Thị Thu Hằng Hoàng Thị Thu Hiền

ii

MỤC LỤC

LỜI CẢM ƠN ........................................................................................................I

MỤC LỤC............................................................................................................ II

DANH MỤC VIẾT TẮT ....................................................................................IV

DANH MỤC BẢNG............................................................................................ V

DANH MỤC HÌNH ............................................................................................VI

ĐẶT VẤN ĐỀ....................................................................................................... 1

CHƢƠNG 1TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU......................................... 2

1.1. GIỚI THIỆU CHUNG VỀ VI HUẨN BACILLUS..................................... 2

1.2. TỔNG QUAN VỀ BACILLUS MEGATERIUM............................................ 3

1.2.1. ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA BACILLUS MEGATERIUM...................... 3

1.2.2. ĐẶC ĐIỂM PHÂN LOẠI........................................................................... 3

1.2.3. ĐẶC ĐIỂM ................................................................................................. 4

1.2.4. LỊCH NGHIÊN CỨU VỀ VI KHUẨN BACILLUS MEGATERIUM ........ 5

1.2.5. TIỀM NĂNG ỨNG DỤNG........................................................................ 5

1.2.6. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VỀ BACILLUS MEGATERIUM.................. 7

CHƢƠNG 2MỤC TIÊU – NỘI DUNG - NGUYÊN LIỆU................................. 9

VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU.................................................................. 9

2.1. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU........................................................................... 9

2.2. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU .......................................................................... 9

2.3. NGUYÊN LIỆU............................................................................................. 9

2.3.1. NGUỒN VI SINH VẬT.............................................................................. 9

2.3.2. HÓA CHẤT .............................................................................................. 10

2.3.3. THIẾT BỊ SỬ DỤNG ............................................................................... 10

2.3.4. MÔI TRƢỜNG NGHIÊN CỨU............................................................... 10

2.4. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU................................................................ 11

2.4.1. PHÂN LẬP, GIỮ CHỦNG VI SINH VẬT TỪ CHẾ PHẨM.................. 13

2.4.2. XÁC ĐỊNH MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH LÝ, SINH HÓA CỦA

BACILLUS........................................................................................................... 13

iii

2.4.3. XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH ENZYME NGOẠI BÀO ............................... 16

2.4.4. XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG CHỐNG CHỊU MỘT SỐ YẾU TỐ BẤT LỢI

CỦA MÔI TRƢỜNG.......................................................................................... 17

2.4.6. KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN......................................... 17

CHƢƠNG 3.KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN....................................................... 19

3.1. PHÂN LẬP VÀ SÀNG LỌC SƠ BỘ CÁC CHỦNG BACILLUS

MEGATERIUM.................................................................................................. 19

3.2. XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG ĐỒNG HÓA NGUỒN CARBON .................... 21

3.3. XÁC ĐỊNH MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH LÝ, SINH HÓA CỦA BACILLUS

............................................................................................................................. 22

3.4. XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG SINH ENZYME NGOẠI BÀO........................... 23

3.4.1. XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH AMYLASE ..................................................... 24

3.4.2. XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH CELLULASE.................................................. 25

3.4.3. XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH PROTEASE .................................................... 26

3.5. XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG CHỐNG CHỊU MỘT SỐ YẾU TỐ BẤT LỢI

CỦA MÔI TRƢỜNG.......................................................................................... 27

3.5.1. XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG CHỊU NHIỆT ................................................. 27

3.5.2. XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG CHỊU NACL .................................................. 28

3.6. XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN............................................. 30

CHƢƠNG 4.KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ....................................................... 32

4.1. KẾT LUẬN.................................................................................................. 32

4.2. KIẾN NGHỊ ................................................................................................. 32

TÀI LIỆU THAM KHẢO................................................................................... 25

iv

DANH MỤC VIẾT TẮT

B. cereus : Bacillus cereus

B.megaterium : Bacillus Megaterium

B.subtilis : Bacillus subtilis

ĐC : Đối chứng

VK : Vi khuẩn

VSV : Vi sinh Vật