Lai ADN – Phần 4 doc

Lai ADN – Phần 4

+ Phân tích RELPs với kỹ thuật lai ADN.

Giới thiệu phương pháp:

Như đã trình bày, sự phức tạp trong kỹ thuật RELP đã tạo ra những khó khăn

cho việc xác định các tác nhân gây bệnh trong các nghiên cứu về dịch tễ học. Điều

này còn khó khăn và phức tạp hơn trong khi so sánh các kết quả thu được trên các

bản gel khác nhau hoặc tại các phòng thí nghiệm khác nhau. Nguyên nhân là do số

lượng các băng ADN lớn tới mức không thể xác định kích thước của chúng hay

các băng thu được không lặp lại các kết quả nghiên cứu.

Mặc dù vậy, theo phương pháp này các phổ ADN phức tạp sau khi xử lý với

enzym cắt hạn chế sẽ được làm biến tính và chuyển lên màng nitroxenluloza hay

nylon. Màng sẽ được lai với mẫu dò thích hợp, kết quả phổ phép lai sẽ rõ và

không quá phức tạp do nó chỉ hiển thị các mảnh ADN bắt cặp với mẫu dò. Với

một số lượng không lớn các mảnh hiển thị thu được sau phép lai sẽ cho phép xác

định được chính xác hơn về kích thước. Điều này làm cơ sở cho so sánh giữa các

gel với nhau cũng như kết quả thu được từ các phòng thí nghiệm khác nhau.

Khi sử dụng phương pháp này cần chú ý một số mẫu dò sau: