Lai ADN – Phần 2 pps

Lai ADN – Phần 2

+ Đánh dấu phóng xạ và ghi phóng xạ:

Phương pháp đánh dấu phóng xạ là phương pháp được dùng phổ biến trong

các phòng thí nghiệm lai ADN với các thành phần đánh dấu là 32P và 35S. Kết quả

của phép lai giữa mẫu dò và ADN đích được phát hiện trên X-phim hoặc nhấp

nháy lỏng. Ưu điểm nổi bật của phương pháp đánh dấu phóng xạ là độ nhạy có thể

đạt tới dưới mức picrogam ADN đích. Hạn chế của phương pháp này là không đạt

được sự thích hợp cần thiết cho các thí nghiệm chẩn đoán liên quan tới xác định

mẫu vi sinh vật, ví dụ thời gian bán huỷ mẫu dò ngắn, nguy hiểm cho người sử

dụng và cần yêu cầu an toàn nghiêm ngặt cho phòng thí nghiệm và cá nhân sử

dụng cũng như việc quản lý chất thải.

Xuất phát từ thực tế trên mà càng ngày người ta càng quan tâm đến các

phương pháp đánh dấu phi phóng xạ. Mục tiêu là đạt được một hệ thống đánh dấu

có độ nhạy tương đương với phương pháp dùng chất phóng xạ. Bảng dưới đây liệt

kê các yêu cầu lý tưởng cho phương pháp đánh dấu mẫu dò:

1, Dễ gắn với acid nucleic theo phương pháp đơn giản và có độ lặp lại cao.

2, Bền trong điều kiện lai và bảo quản.