Đánh giá hoạt tính kháng vi nấm Neoscytalidium sp. gây bệnh đốm nâu trên cây thanh long của nano bạc tổng hợp bằng phương pháp sinh học sử dụng dịch chiết cỏ đậu phộng (Arachis pintoi)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

BÁO CÁO TỔNG KẾT

ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN

TÊN ĐỀ TÀI: ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH KHÁNG VI

NẤM Neoscytalidium sp. GÂY BỆNH ĐỐM NÂU TRÊN

CÂY THANH LONG CỦA NANO BẠC TỔNG HỢP

BẰNG PHƢƠNG PHÁP SINH HỌC SỬ DỤNG DỊCH

CHIẾT CỎ ĐẬU PHỘNG (Arachis pintoi)

Mã số đề tài:

Bình Dƣơng, tháng 3 năm 2019

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

BÁO CÁO TỔNG KẾT

ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN

TÊN ĐỀ TÀI: ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH KHÁNG VI

NẤM Neoscytalidium sp. GÂY BỆNH ĐỐM NÂU TRÊN

CÂY THANH LONG CỦA NANO BẠC TỔNG HỢP

BẰNG PHƢƠNG PHÁP SINH HỌC SỬ DỤNG DỊCH

CHIẾT CỎ ĐẬU PHỘNG (Arachis pintoi)

Mã số đề tài:

Chủ nhiệm đề tài: Lê Thị Bích Hằng

Khoa: Công nghệ Sinh học

Các thành viên: Lƣơng Thị Cẩm Vân

Huỳnh Xuân Thƣơng

Trần Huỳnh Thùy Dƣơng

Ngƣời hƣớng dẫn: ThS. Nguyễn Văn Minh

ThS. Nguyễn Phụng Anh

Bình Dƣơng, tháng 3 năm 2019

MỤC LỤC

PHẦN I: PHẦN MỞ ĐẦU............................................................................................................ 1

1. Lý do chọn đề tài...................................................................................................2

2. Mục tiêu nghiên cứu..............................................................................................3

3. Đối tƣợng nghiên cứu............................................................................................3

4. Phạm vi nghiên cứu...............................................................................................3

PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU............................................................................................ 4

1. Cây thanh long và bệnh trên cây thanh long. ........................................................5

1.1. Tổng quan về cây thanh long..........................................................................5

1.2. Sơ lƣợc về bệnh đốm nâu trên cây thanh long ...............................................6

1.2.1. Tình trạng bệnh ...........................................................................................6

1.2.2. Tác nhân gây bệnh ......................................................................................6

1.2.3. Triệu chứng bệnh ........................................................................................7

1.2.4. Cách phòng bệnh.........................................................................................8

2. Kỹ thuật xác định loài bằng sinh học phân tử (PCR)............................................9

2.1. Định nghĩa PCR..............................................................................................9

2.2. Nguyên tắc ......................................................................................................9

2.3. Vùng ITS rDNA ...........................................................................................10

3. Tổng quan về nano bạc........................................................................................11

3.1. Sơ lƣợc về nano bạc......................................................................................11

3.2. Lợi ích của nano bạc.....................................................................................11

3.3. Khả năng kháng vi khuẩn và vi nấm của nano bạc ......................................12

3.4. Phƣơng pháp hóa học xanh...........................................................................12

3.5. Tổng quan về cỏ đậu phộng..........................................................................13

4. Tình hình nghiên cứu ..........................................................................................14

4.1. Trên thế giới .................................................................................................14

4.2. Trong nƣớc ...................................................................................................15

PHẦN III:VẬT LIỆU & PHƢƠNG PHÁP…………………………………………..17

1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu.......................................................................18

2. Vật liệu ................................................................................................................18

3. Thiết bị, dụng cụ, môi trƣờng..............................................................................18

3.1. Thiết bị..........................................................................................................18

3.2. Dụng cụ.........................................................................................................18

4. Môi trƣờng, hóa chất, thuốc nhuộm....................................................................19

5. Phƣơng pháp thí nghiệm .....................................................................................19

5.1. Kiểm tra, tái phân lập và định danh sinh học phân tử chủng nấm

Nescytalidium sp.....................................................................................................19

5.1.1. Kiểm tra, tái phân lập chủng nấm bệnh ....................................................19

5.1.2. Định danh nấm bệnh bằng phƣơng pháp sinh học phân tử.......................19

5.2. Tổng hợp nano bạc .......................................................................................20

5.2.1. Chuẩn bị dịch chiết cỏ đậu phộng:............................................................20

5.2.2. Chuẩn bị dung dịch AgNO3: .....................................................................20

5.2.3. Tạo dung dịch bạc nano ............................................................................20

5.3. Phƣơng pháp khuếch tán giếng thạch...........................................................20

5.3.1. Nguyên tắc.................................................................................................20

5.3.2. Cách tiến hành...........................................................................................21

5.3.3. Đọc kết quả................................................................................................21

5.4. Phƣơng pháp nồng độ ức chế tối thiểu trên đĩa thạch (MIC - Minimum

Inhibitory Concentration) .......................................................................................21

5.4.1. Nguyên tắc.................................................................................................21

5.4.2. Cách tiến hành...........................................................................................21

5.4.3. Đọc kết quả................................................................................................22

PHẦN IV: KẾT QUẢ & THẢO LUẬN……………………………………………..23

1. Kết quả kiểm tra chủng nấm Neosytalidium sp...................................................24

2. Kết quả tổng hợp dung dịch nano bạc.................................................................26

3. Kết quả định tính kháng nấm bệnh của nano bạc bằng phƣơng pháp khuếch tán

giếng thạch. ................................................................................................................30

4. Kết quả định lƣợng kháng nấm của nano bạc bằng phƣơng pháp ức chế tối thiểu.

30

PHẦN V: KẾT LUẬN & KIẾN NGHỊ..................................................................................... 33

1. Kết luận ...............................................................................................................34

2. Kiến nghị .............................................................................................................34

PHẦN VI: TÀI LIỆU THAM KHẢO………………………………………………...35

1. Tài liệu tiếng Việt:...............................................................................................36

2. Tài liệu tiếng Anh:...............................................................................................37

3. Tài liệu internet: ..................................................................................................40

PHẦN VII: PHỤ LỤC………………………………………………………………..42