Phân tích đột biến mất đoạn 4977 bp của DNA ty thể ở bệnh nhân ung thư đại trực tràng

Phân tìch đột biến mất đoạn 4977 bp của DNA

ty thể ở bệnh nhân ung thư đại trực tràng

Hoàng Thị Thùy Dung

Trường Đại học Khoa học Tự nhiên

Luận văn ThS. ngành: Sinh học thực nghiệm; Mã số: 60 42 30

Người hướng dẫn: PGS.TS. Trịnh Hồng Thái

Năm bảo vệ: 2012

Abstract. Tổng quan về DAN ty thể; đột biến DNA ty thể (MT DNA) chỉ thị sinh

học tiềm năng trong ung thu; ung thư đại trực trạng và mối liên hệ với đột biến mất

đoạn 4977 BP xảy ra trong DNA ty thể. Phân tìch đột biến mất đoạn 4977 bp của

DNA ty thể ở bệnh nhân ung thư đại trực tràng. Trính bày phương pháp nghiên cứu:

Tách chiết DNA tổng số từ mô; khuếch đại đột biến mất đoạn 4977 bp mtDNA bằng

PCR; xử lý sản phẩm PCR khuếch đại đột biến mất đoạn 4977 bp mtDNA bằng

enzyme HaeIII; quy trính tinh sạch sản phẩm PCR sử duṇ g kit QIAQUICK gel

extraction; điện di kiểm tra sản phẩm PCR trên gel; phương pháp giải trính tự; tình

toán thống kê. Đưa ra kết quả và thảo luận: Đặc điểm bệnh học lâm sàng của các

bệnh nhân ung thu đại trực tràng; kết quả tách chiết DNA tổng số từ mẫu mô ung

thư đại trực tràng; kết quả khuếch đại đột biến mất đoạn 4977 bp của DNA ty thể

bằng kỹ thuật PCR; kaats quả xử lý sản phẩm PCR sử dụng cặp mồi 4977-2 bằng

Enzyme giới hạn; kết quả giải trính tự sản phẩm PCR của đột biến mất đoạn 4977 bp

của mtDNA; phân tìch mối liên quan giữa đột biến mất đoạn 4977 bp của DNA ty

thể và các đặc điểm bệnh học lâm sàng của bệnh ung thư đại trực tràng; thống kê

mức độ Heteroplasmy xảy ra trong DNA ty thể.

Keywords. Sinh học thực nghiệm; DNA; Bệnh nhân ung thư; Ung thư đại trực

tràng; Di truyền học hóa sinh; Đột biến gen

Content

Chƣơng 1: TỔNG QUAN

1.1 DNA TY THỂ

Ty thể là những bào quan có thể được tím thấy trong gần như tất cả các tế bào có

nhân. Số lượng của ty thể trong mỗi tế bào ở mỗi loài là khác nhau [36]. Ty thể là bào quan

có hính tròn hoặc hính trụ dài, có kìch thước đường kình 0,2-1 µm, chiều dài 2-5 µm. Toàn

bộ cấu trúc của ty thể được bao bọc bởi hai lớp màng cấu tạo bởi protein và lớp phospholipid

kép. Không gian bên trong có chứa chất nền và có thể tím thấy các sợi DNA, ribosome …Tại

đây chúng có thể mã hóa một phần các protein của chúng bằng chình bộ máy di truyền của

riêng mính [18]. Trong ty thể, ARN chiếm khoảng 0,5-3%, DNA khoảng 0,024 – 0,34% [18].

Ty thể là trung tâm hô hấp của tế bào là nơi sản sinh ra ATP, cung cấp năng lượng cho tế bào.

Ty thể có hệ gen độc lập nên ty thể có khả năng tự sinh sản bằng các phân đôi ty thể mẹ để

sinh ra các ty thể con [3].