Nhân gene và kỹ thuật giải trình tự ADN ppt

Nhân gene và kỹ thuật giải trình tự ADN

Kỹ thuật lai ADN đã được sử dụng rộng rãi cho các nghiên cứu xác định typ

của nhiều đối tượng vi sinh vật. Nguồn ADN đích đôi khi chỉ có số lượng ít trừ khi

các tiến hành nuôi cấy vi sinh vật. Trong một số trường hợp việc nuôi cấy không

thể thực hiện được với nhiều loài vi sinh vật hay virút hoặc trong các trường hợp

khác cần thời gian dài nuôi cấy vi sinh vật để có đủ ADN cho các kỹ thuật lai hay

định typ. Khó khăn này được khắc phục bằng cách làm tăng nguồn ADN đích một

cách nhanh chóng bằng kỹ thuật nhân gene PCR.

a. Kỹ thuật nhân gene PCR (Polymerase Chain Reaction)

Việc nhân ADN cho phép làm tăng số lượng gấp hàng triệu hoặc nhiều hơn

nữa đối với đoạn ADN hay ARN nghiên cứu. Có nhiều phương pháp khác nhau để

phân tích nguồn ADN khuyếch đại theo cách này. Phương pháp đơn giản nhất là

sử dụng điện di để xác định kích thước sản phẩm của phản ứng PCR. Có thể xác

định độ nhạy và tính đặc hiệu cao hơn nếu sản phẩm PCR được lai với mẫu dò đặc

hiệu đã được đánh dấu. Phương pháp đưa lại thông tin nhiều nhất là xác định được

trình tự ADN và ARN của sản phẩm PCR. Việc xác định được sai khác của chuỗi

ADN sẽ cho phép xác định và định typ chính xác nhất các đối tượng vi sinh vật