Nghiên Cứu Trích Ly Flavonoid Và Xác Định Hàm Lượng Vitamin C Trong Hoa Súp Lơ Xanh

i

LỜI CẢM ƠN

Sau khi kết thúc khóa học tại Viện Công Nghệ Sinh Học Lâm Nghiệp,

Trƣờng Đại Học Lâm Nghiệp Việt Nam, đƣợc sự giúp đỡ của quý thầy cô trong

Viện, năm học 2018-2019 này em đã có thể tiến hành làm bài khóa luận với đề

tài “ Nghiên cứu trích ly flavonoid và xác định hàm lượng vitamin C trong

hoa Súp lơ xanh”.

Đầu tiên em xin đƣợc gửi lời cảm ơn sâu sắc nhất đến cô giáo trực tiếp

giúp em rất nhiều trong quá trình thực hiện khóa luận – Thạc sỹ Nguyễn Thị

Thu Hằng, ngƣời đã định hƣớng và chỉ bảo em rất nhiều kiến thức và những

điều em còn sai sót trong quá trình thực hiện, cô đã truyền đạt cho em rất nhiều

kiến thức và những kinh nghiệm quý báu, cách tiếp cận với vấn đề, cách giải

quyết những vấn đề đang còn bị khúc mắc.

Ngoài ra để có thể hoàn thành tốt bài khóa luận này không thể không kể

đến sự giúp đỡ của các Thầy Cô trong Viện Công Nghệ Sinh Học Lâm Nghiệp,

Trƣờng Đại Học Lâm Ngiệp Việt Nam, gia đình cũng nhƣ các bạn đã ở bên giúp

đỡ em rất nhiều trong quãng thời gian qua.

Em xin chân thành cảm ơn đến Thầy Cô giáo và th.s Nguyễn Thị Hồng

Nhung của Bộ môn Công nghệ Vi Sinh - Hóa Sinh đã hỗ trợ và tạo điều kiện

cho em về trang thiết bị một cách tốt nhất để em có thể hoàn thành đƣợc khóa

luận.

Dù đƣợc sự chỉ bảo tận tình của ThS. Nguyễn Thị Thu Hằng và các Thầy

Cô trong viện, cùng với sự nỗ lực của bản thân em đã cố gắng hoàn thiện khóa

luận. Tuy nhiên em trong quá trình thực hiện, em còn rất nhiều sai sót, kiến thức

còn hạn chế. Em kính mong nhận đƣợc sự đóng góp ý kiến đánh giá của Thầy

Cô để khoá luận của em đƣợc hoàn thiện hơn.

Em xin chân thành cảm ơn .

ii

MỤC LỤC

LỜI CẢM ƠN ........................................................................................................i

MỤC LỤC.............................................................................................................ii

DANH MỤC BẢNG............................................................................................iv

DANH MỤC HÌNH .............................................................................................. v

MỞ ĐẦU............................................................................................................... 1

1.1. Giới thiệu về cây Súp lơ xanh........................................................................ 2

1.1.1.Tên khoa học, nguồn gốc, phân loại ............................................................ 2

1.1.2. Đặc điểm hình thái ...................................................................................... 2

1.1.3. Thành phần dinh dƣỡng của hoa Súp lơ xanh[5]........................................ 3

1.1.4. Tác dụng sinh học của hoa Súp lơ .............................................................. 5

1.2. Tổng quan về flavonoid ................................................................................. 7

1.2.1. Khái niệm.................................................................................................... 7

1.2.2. Cấu trúc chung và phân loại....................................................................... 8

1.2.3. Tính chất lý hóa......................................................................................... 13

1.2.4. Tính chất sinh học của flavonoid .............................................................. 14

1.3. Tình hình nghiên cứu, ứng dụng và sản xuất ở trong nƣớc ......................... 16

1.4. Tình hình nghiên cứu, ứng dụng và sản xuất trên thế giới .......................... 17

CHƢƠNG 2 : NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU.................... 18

2.1. Mục tiêu nghiên cứu..................................................................................... 18

2.2. Nội dung nghiên cứu.................................................................................... 18

2.3. Vật liệu nghiên cứu ...................................................................................... 18

2.3.1. Vật liệu thực vật ........................................................................................ 18

2.3.2. Vật liệu vi sinh vật .................................................................................... 18

2.3.3. Môi trƣờng nghiên cứu vi sinh vật............................................................ 19

2.4. Thiết bị dụng cụ, hóa chất nghiên cứu ......................................................... 19

2.5. Phƣơng pháp nghiên cứu.............................................................................. 19

2.5.1. Xác định độ ẩm của hoa Súp Lơ ............................................................... 19

2.5.2. Yếu tố ảnh hƣởng đến quá trình tách chiết flavonoid............................... 20

2.5.3. Xác định sự có mặt của flavonoid trong dịch chiết................................... 23

2.5.4. Xác định hoạt tính kháng vi sinh vật của hợp chất flavonoid tách chiết từ

hoa Súp lơ xanh................................................................................................... 24

2.5.5. Xác định hàm lƣợng Vitamin C trong hoa Súp Lơ xanh .......................... 25

PHẦN 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ............................................................ 28

3.1. Xác định độ ẩm ............................................................................................ 28

3.2. Xác định loại dung môi thích hợp cho quá trình trích ly ............................. 29

iii

3.3. Tách chiết flavonoid từ hoa Súp lơ xanh bằng phƣơng pháp siêu âm và theo

quy trình ngâm chiết bằng ethanol...................................................................... 30

3.4. Tối ƣu một số điều kiện trong quá trình tách chiết flavonoid từ hoa Súp lơ

xanh ..................................................................................................................... 30

3.4.1. Ảnh hƣởng của nhiệt độ đến hiệu quả trích ly.......................................... 30

3.4.2. Ảnh hƣởng của nồng độ ethanol đến khả năng trích ly ............................ 31

3.4.3. Ảnh hƣởng của thời gian chiết bằng ethanol ............................................ 32

3.4.4. Ảnh hƣởng của tỷ lệ nguyên liệu /dung môi ethanol............................... 33

3.5.. Xác định sự có mặt của flavonoid trong cao chiết ...................................... 34

3.5.1. Định tính flavonoid bằng phản ứng màu đặc trƣng .................................. 34

3.5.2. Định tính flavonoid bằng sắc ký lớp mỏng............................................... 35

3.6. Xác định hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định của flavonoid chiết suất từ

hoa Súp lơ xanh................................................................................................... 36

3.7. Xác định hàm lƣợng vitamin C.................................................................... 38

CHƢƠNG 4. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ...................................................... 39

4.1. Kết luận ........................................................................................................ 39

4.2. Kiến nghị...................................................................................................... 39

TÀI LIỆU THAM KHẢO

iv

DANH MỤC BẢNG

Bảng 1.1. Giá trị dinh dƣỡng của hoa Súp lơ........................................................ 5

Bảng 3.1. Độ ẩm của hoa Súp Lơ ....................................................................... 28

Bảng 3.2. Trị số đo OD của dịch chiết cồn......................................................... 29

Bảng 3.3. Kết quả tách chiết Flavonoid .............................................................. 30

Bảng 3.4. Ảnh hƣởng của nhiệt độ đến khả năng trích ly................................... 31

Bảng 3.5. Ảnh hƣởng của nồng ethanol độ đến hiệu suất trích ly...................... 32

Bảng 3.6. Ảnh hƣởng của thời gian chiết bằng ethanol đến hiệu suất trích ly ... 33

Bảng 3.7. Ảnh hƣởng của tỷ lệ nguyên liệu/ dung môi ethanol đến hiệu suất trích

ly.......................................................................................................................... 34

Bảng 3.8. Định tính xác định sự có mặt của flavonoid....................................... 34

Bảng 3.9. Tính kháng các chủng vi sinh vật kiểm định của dịch Flavonoid ...... 37

Bảng 3.10. Hàm lƣợng viatamin C của hoa Súp lơ............................................. 38