Nghiên cứu thu nhận và đánh giá các loại tế bào đệm phục vụ cho nuôi phôi in Vitro

Hứa Nguyệt Mai và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 97(09): 81 - 86

81

NGHIÊN CỨU THU NHẬN VÀ ĐÁNH GIÁ CÁC LOẠI TẾ BÀO ĐỆM PHỤC VỤ

CHO NUÔI PHÔI IN VITRO

Hứa Nguyệt Mai1*, Bùi Xuân Nguyên2

,

Nguyễn Văn Hạnh2

, Nguyễn Việt Linh2

1

Trường Đại học Khoa học – Đại học Thái Nguyên

2Viện công nghệ sinh học – Viện KH&CN Việt Nam

TÓM TẮT

Nghiên cứu này được tiến hành với mục đích khảo sát việc thu nhận các loại tế bào đệm phục vụ

cho nuôi phôi in vitro. Thí nghiệm 1 thực hiện trên tế bào màng trong vòi trứng lợn, kết quả cho

thấy: số cụm tế bào thu được ở vòi trứng đẹp, to, ít mạch máu, tốt hơn rõ rệt hơn so với tế bào thu

được ở vòi trứng đẹp, nhỏ và vòi trứng nhiều mạch máu. Tế bào màng trong vòi trứng sau khi giải

đông có chất lượng tương tự như tế bào không đông lạnh. Thí nghiệm 2 thực hiện trên nguyên bào

sợi phôi chuột, kết quả là: các nguyên bào sợi được thu nhận từ các bào thai chuột nhắt trắng, nhân

nuôi trong môi trường DMEM có bổ sung 10% huyết thanh bò. Số lượng nguyên bào sợi trung

bình thu được từ bào thai chuột là 17,76 triệu tế bào. Tốc độ phát triển của các tế bào sau khi đông

lạnh tương tự với các tế bào không đông lạnh. Tóm lại, việc thu nhận, đánh giá chất lượng của tế

bào trước và sau đông lạnh đã được thực hiện trên 2 loại tế bào vòi trứng của lợn và phôi chuột.

Nghiên cứu này sẽ là cơ sở để sản xuất các loại tế bào đệm dùng để cải tiến chất lượng các phôi

nuôi cấy in vitro, phục vụ cho các nghiên cứu y sinh trong tương lai.

Từ khóa: vòi trứng, nguyên bào sợi, phôi, nhân nuôi.

ĐẶT VẤN ĐỀ*

Ngày nay, công nghệ sinh học nói chung và

công nghệ sinh học trong lĩnh vực sinh sản

nói riêng đang rất phát triển và đạt nhiều

thành tựu quan trọng, đem lại nhiều ý nghĩa

và lợi ích thiết thực trong cuộc sống. Phôi là

nguồn vật liệu quan trọng trong chuyển cấy

phôi tạo nguồn động vật đồng loạt, phục vụ

cho các thử nghiệm trong y học, hoặc nhằm

mục đích nâng cao năng suất vật nuôi trong

chăn nuôi hay một ý nghĩa quan trọng là bảo

tồn những loài động vật quý hiếm. Việc tạo ra

được phôi với chất lượng và số lượng tốt là

rất quan trọng trong nghiên cứu và ứng dụng.

Cải tiến môi trường nuôi là một trong những

hướng chính để nâng cao hiệu suất tạo phôi.

Nghiên cứu của chúng tôi được tiến hành với

mục tiêu thu nhận và đánh giá các loại tế bào

đệm bổ sung môi trường nuôi phôi giúp cải

tiến hệ thống nuôi phôi in vitro.

VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG

PHÁP NGHIÊN CỨU

Vật liệu nghiên cứu: Ống dẫn trứng lợn thu

từ các lợn cái Yorkshire (đại bạch) khỏe

*

Tel: 0973 113 541; Email: [email protected]

mạnh, không có dị tật, được lấy tại lò mổ ở

Hà Nội. Chuột nhắt trắng được cung cấp bởi

Trung tâm chăn nuôi Động vật thí nghiệm,

Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương, Bộ Y tế.

Nội dung nghiên cứu:

- Thu, nuôi cấy, đánh giá chất lượng tế bào

màng trong vòi trứng từ ống dẫn trứng lợn.

- Nuôi cấy, đánh giá chất lượng tế bào màng

trong vòi trứng của lợn sau đông lạnh.

- Thu nhận, nhân nuôi, đánh giá chất lượng

tế bào nguyên bào sợi từ thai chuột

- Nhân nuôi và đánh giá chất lượng nguyên

bào sợi từ thai chuột sau đông lạnh.

Phương pháp nghiên cứu

- Phương pháp thu tế bào màng trong vòi trứng

lợn [1]: Chúng tôi chia làm 3 nhóm thí nghiệm:

Nhóm 1: thu cụm tế bào từ vòi trứng to, đẹp,

ít mạch máu

Nhóm 2: thu cụm tế bào từ vòi trứng nhỏ,

đẹp, ít mạch máu

Nhóm 3: thu cụm tế bào từ vòi trứng có nhiều

mạch máu

Ống dẫn trứng sau khi thu về phòng thí

nghiệm được rửa sạch, cắt bỏ hết các lớp