Nghiên cứu nuôi cấy lỏng lắc thu sinh khối lan kim tuyến bản địa anoectochilus roxburghii(wall.) Lindl in vitro

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

BÁO CÁO TỔNG KẾT

ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN

NGHIÊN CỨU NUÔI CẤY LỎNG LẮC THU SINH

KHỐI LAN KIM TUYẾN BẢN ĐỊA

ANOECTOCHILUS ROXBURGHII(WALL.) LINDL

IN VITRO

Mã số đề tài:…

Bình Dƣơng, 03/2019

iii

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

BÁO CÁO TỔNG KẾT

ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN

NGHIÊN CỨU NUÔI CẤY LỎNG LẮC THU SINH

KHỐI LAN KIM TUYẾN BẢN ĐỊA

ANOECTOCHILUS ROXBURGHII(WALL.) LINDL

IN VITRO

Mã số đề tài:…

Chủ nhiệm đề tài: Trần Văn Minh

Khoa: Công nghệ sinh học

Các thành viên: Đoàn Thúy Vy

Lữ Hoàng Thông

Châu Ngọc Quí

Ngƣời hƣớng dẫn: Nguyễn Thanh Mai

Bình Dƣơng, 03/2019

iv

LỜI CẢM ƠN

Trong suốt quá trình học tập tại giảng đƣờng Đại học và hoàn thành đề tài thực tập

tốt nghiệp này, em đã nhận đƣợc sự giúp đỡ, quan tâm và hỗ trợ từ phía nhà trƣờng, Thầy

Cô, gia đình và bạn bè.

Em xin gửi lời tri ân sâu sắc đến cô Nguyễn Thanh Mai, ngƣời đã nâng đỡ em từ

những kinh nghiệm chuyên môn và cả sự nâng đỡ về tinh thần trong những bƣớc đầu thực

hiện đề tài thực tập đầy bỡ ngỡ.

Em xin cảm ơn thầy Mai Trƣờng, chị Thu Hiền và anh Thê trên Viện Sinh học

Nhiệt đới đã giúp đỡ, chia sẽ cho em những kinh nghiệm chuyên môn và tạo cho em điều

kiện để thực hiện đề tài thực tập.

Em xin cảm ơn ban giám hiệu nhà trƣờng, quý Thầy Cô của khoa Công nghệ Sinh

học trƣờng Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh đã tạo điều kiện học tập và truyền đạt

kiến thức quý báu cho em trong suốt quá trình học tập.

Em xin cảm ơn anh Thiên Hùng, chị Hoàng Quyên, chị Thu Ngân, chị Vy các bạn

cùng khóa đã hỗ trợ em trong quá trình thực hiện đề tài thực tập.

Cuối cùng, con xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Ba mẹ và những ngƣời thân trong

gia đình đã yêu thƣơng, chăm sóc, động viên con trong suốt quá trình học tập.

Em xin chân thành cảm ơn!

Thành phố Hồ Chí Minh, ngày….tháng…năm 2018

Trần Văn Minh

v

MỤC LỤC

LỜI CẢM ƠN.....................................................................................................................iii

DANH MỤC BẢNG .........................................................................................................vii

DANH MỤC HÌNH .........................................................................................................viii

DANH MỤC VIẾT TẮT....................................................................................................ix

ĐẶT VẤN ĐỀ..................................................................................................................... 1

PHẦN I. TỔNG QUAN TÀI LIỆU .................................................................................. 11

1.TỔNG QUAN TÀI LIỆU........................................................................................ 12

1.1. Sơ lƣợc về lan kim tuyến .................................................................................... 12

1.2. Nuôi cấy mô tế bào thực vật............................................................................... 14

1.3. Những nghiên cứu trong và ngoài nƣớc về kỹ thuật nuôi cấy lỏng lắc............... 19

PHẦN II: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .......................................... 21

2. VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU................................................ 22

2.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu: ..................................................................... 22

2.2. Nguyên vật liệu:.................................................................................................. 22

2.3. Trang thiết bị và hóa chất ................................................................................... 22

2.3.1. Thiết bị............................................................................................................. 22

2.3.2. Hóa chất........................................................................................................... 23

2.4. Môi trƣờng nuôi cấy ........................................................................................... 23

2.5. Điều kiện nuôi cấy .............................................................................................. 24

2.6. Phƣơng pháp nghiên cứu: ................................................................................... 24

PHẦN III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN......................................................................... 29

3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN................................................................................ 30

3.1. Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hƣởng của hàm lƣợng đƣờng và nồng độ nƣớc dừa

đến khả năng tạo sinh khối của lan kim tuyến............................................................ 30

3.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hƣởng của hàm lƣợng đƣờng và nồng độ casein đến

khả năng tạo sinh khối của lan kim tuyến................................................................... 36

3.3. Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hƣởng của hàm lƣợng đƣờng và nồng độ dịch chiết

nấm men đến khả năng tạo sinh khối của lan kim tuyến............................................ 51

vi

PHẦN IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ....................................................................... 414

4.1. Kết luận................................................................................................................ 45

4.2. Kiến nghị ............................................................................................................. 45

TÀI LIỆU THAM KHẢO................................................................................................. 46

PHỤ LỤC .......................................................................................................................... 48

vii

DANH MỤC BẢNG

Bảng 2.4: Thành phần dung dịch dinh dƣỡng MS ........................................................ 14

Bảng 2.6.2: Nghiệm thức khảo sát ảnh hƣởng nồng độ nƣớc dừa và đƣờng đến khả năng

tạo sinh khối lan kim tuyến .......................................................................................... 17

Bảng 2.6.3: Nghiệm thức khảo sát ảnh hƣởng nồng độ casein và đƣờng đến khả năng tạo

sinh khối lan kim tuyến ................................................................................................. 18

Bảng 3.1.1: Kết quả khối lƣợng của lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy.................... 21

Bảng 3.1.2: Kết quả chiều cao của lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy ...................... 22

Bảng 3.1.3: Kết quả số lá của lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy .............................. 22

Bảng 3.2.1: Kết quả khối lƣợng của lan kim tuyến sau 45 ngày nuôi cấy .................... 27

Bảng 3.2.2 Kết quả chiều cao của lan kim tuyến sau 45 ngày nuôi cấy ....................... 28

Bảng 3.2.3: Kết quả số lá của lan kim tuyến sau 45 ngày nuôi cấy…………..………28