Giải trình tự ADN pptx

Giải trình tự ADN

Phương pháp chính xác và đưa lại nhiều thông tin nhất cho định danh và

định typ vi sinh vật là xác định chính xác trình tự chuỗi ADN của một vùng quy

định trên nhiễm sắc thể. Phương pháp giải trình tự ADN phát triển nhanh chóng,

kết quả so sánh sự tương đồng của trình tự gene nghiên cứu trở thành phương

pháp phân loại chuẩn theo sinh học phân tử trong nghiên cứu hệ thống học và cây

phả hệ di truyền giữa các đối tượng nghiên cứu. Các gene bảo thủ được giải trình

tự làm cơ sở để xác định vị trí của sinh vật nghiên cứu, trong khi đó các trình tự

không tương đồng (khác biệt) lại làm cơ sở cho sự biệt hóa cũng như xác định mối

quan hệ giữa các cá thể gần với nhau.

+ Nguyên tắc:

Phương pháp giải trình tự ADN theo nguyên tắc tạo ra các mảnh ADN

được đánh dấu tại đầu 5’ hoặc 3’. Các mảnh có các base đánh đấu được tách ra

trên gel polyacrylamid Các mảnh được phân biệt về vị trí trên gel với sự sai khác

chỉ với một nucleotid. Việc đánh dấu và đọc kết quả theo các kỹ thuật và phương

pháp khác nhau. Việc tạo ra các mảnh ADN sai khác nhau về 1 nucleotid được

trình bày theo 2 phương pháp: phương pháp hóa học (Maxam & Gilbert, 1997) và