Đặc điểm trình tự nucleotide của gen Cystatin II phân lập từ mRNA của hai mẫu ngô địa phương Sơn La và Hà Giang

Vì Thị Xuân Thủy và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 119(05): 101 - 106

101

ĐẶC ĐIỂM TRÌNH TỰ NUCLEOTIDE CYSTATIN II PHÂN LẬP

TỪ mRNA CỦA HAI MẪU NGÔ ĐỊA PHƢƠNG SƠN LA VÀ HÀ GIANG

Vì Thị Xuân Thủy1*

, Đặng Thị Hoa2

,

Nguyễn Vũ Thanh Thanh2

, Chu Hoàng Mậu3

1

Trường Đại học Tây Bắc,

2

Trường Đại học Khoa học - ĐH Thái Nguyên,

3

Trường Đại học Sư phạm - ĐH Thái Nguyên

TÓM TẮT

Cysteine proteinase thực hiện chức năng trƣởng thành protein, làm mới protein để phù hợp với

những thay đổi của môi trƣờng và loại bỏ protein bất thƣờng. Cystatin là một dạng protein ức chế

hoạt động của cysteine proteinase, nó đóng vai trò nhƣ cơ chất để xâm nhập vào trung tâm hoạt

động của cysteine proteinase vì thế ngăn cản việc đi vào của cơ chất protein khác. Do đó, cystatin

có mối liên quan đến khả năng chống vi sinh vật, chống côn trùng, trong đó có mọt gây hại của

thực vật. Trong nghiên cứu này, chúng tôi trình bày kết quả phân lập, tách dòng và xác định trình

tự nucleotide của gen cystatin II từ mRNA của hai mẫu ngô địa phƣơng Sơn La (SL) và Hà Giang

(HG). Gen cystatin II phân lập đƣợc có kích thƣớc 405 bp, mã hoá 134 amino acid. Có 9 vị trí

38130,

nhƣng không có sự sai khác ở điểm gắn kết của vùng chức năng CY. Gen cystatin II đã phân lập đƣợc

sử dụng để thiết kế vector chuyển gen nhằm cải thiện khả năng kháng mọt của cây ngô.

Từ khóa: Cystatin, cysteine proteinase, gen cystatin II, mọt ngô, Zea mays

MỞ ĐẦU*

Ở Việt Nam, ngô (Zea mays L.) là cây lƣơng

thực quan trọng thứ hai sau

[0

, ngô lai rất dễ bị mọt xâm hại.

Mọt ngô (Sitophilus zeamais

.

Sâu non nở trong hạt thƣờng ă

[4], [8].

-

ở động vật, thực vật và vi sinh vật [2].

Ở động vật không xƣơng sống, cysteine

proteinase là enzyme tiêu hóa [2], [9

cysteine proteinase

gen cystatin ch

*

Tel: 0983 484171, Email: [email protected]

.

cysteine proteinase

.

. Trong bài

cystatin II

kế vector chuyển gen mang cấu trúc cystatin

II

.

,

Sử dụng hai mẫu ngô địa phƣơng thu thập ở

tỉnh Sơn La (SL) và tỉnh Hà Giang (HG).

RNA tổng số đƣợc tách chiết bằng Trizol

Reagent KIT; cDNA đƣợc tổng hợp theo quy

trình Maxima® First Strand cDNA Synthesis

KIT; gen cystatin đƣợc khuếch đại bằng kỹ

thuật PCR với cặp mồi đặc hiệu theo chu kỳ

nhiệt: 940C/4 phút - (940C/45 giây - 580C/30