Xác định động lực và tính mẫn cảm kháng sinh của vi khuẩn E.coli phân lập từ bệnh phẩm lợn sau cai sữa bị bệnh tiêu chảy

KHOA HOC CdNG NGHE

XAC DIIMH DO C Ly c V A TIIXIH IViAI\l CAM KHAIVG SIIMH

CLIA VI KHUAIM E ,CaU PHAIM LAP TLT BEIMH PHA M

LOIM SA U CAI SUA Bf BEIMH TIEU CHA Y

Nguyin Xudn HdaS D$ng Cdng Tin',

Nguyin Thj Hiln^ Ll Vdn Phudc^

T6MTAT

Tir cac mdu benh pham dupc thu thap tr^n Ipn sau cai sira bi b^nh ti^u chay d dia ban tinh Thira Thi6n -

Hue, da tien hanh phdn lap vi khuan E. coliAi kilm tra kha nang mang gien san sinh dpc td STa, STb, LT,

Vtx2e. Chung vi khuan E. coZr duong tinh vdi mot trong cac ylu td dpc lire, tiin hdnh thii dpc lire tr^n chupt

nhit trdng cho thay cac chung mang gien dpc diu gay chet 100% chuot, frong khoang tir 6 - 20 gid. Qua

kilm tra tinh mIn cam khang sinh cho thdy cac chting vi khudn E. coZ''phan lap tir b^nh pham d khu vtrc

Thira Thien Hue de khang vdi cac loai khang sinh: Norfloxaxin, amoxilin, ampixilin, kanamyxin,

gentamyxin, oxaxilin (tir 70-100%). Cac chiing fren deu mdn cam cao vdi cac loai khang sinh nhir Colistin,

sfreptomyxin, cefoperazon, ciprofloxaxin, cefotaxin, vdi cac ty le tuong ting la 80-100%.

Tirkh6a: E. coli, khang khang sinh, doc luc.

LDATVANDE

Benh tieu chay d Ipn sau cai sua gay tdn that ldn

cho chdn nudi ndng hd ciing nhu chdn nudi cdng

nghiep, vi khuan E. coli la nguyin nhan chii yeu vd

thudng gdp (Fairbrother, 1992). Cdc chiing vi khudn

E. coli thudc nhdm Enterotoxigenic E. coli (ETEC)

tham gia vdo qud trinh gay binh nhd hai yeu td dpc

lire chii yeu: kha ndng bam dinh vao cac te bdo bilu

md rupt nhd cac khdng nguyin bam dinh (pili) cd

trin bl mdt cua vi khuan nhu F4 (K88), F5 (K99), F6

(987?), F17, F18, F41 vd kha ndng san sinh mot hay

nhieu loai dpc td dudng rupt (Enterotoxin) bao gdm

dpc td chiu nhilt ST (heat stable toxin) vd dpc td

khdng chiu nhilt LT (heat labile toxin) (Nagy, 1999).

Nhd ky thuat PCR cd thi xac dinh dupc sir cd mdt

ciia cac gien gdy benh. Vi khuan E. coli mang gien

dpc vd nd cd the gay benh khi cac gien dd d trang

thai hoat ddng, trong trudng hpp mang gien nhung

gien khdng dupe kich hoat thi khdng cd vai trd gay

binh. Vile sii dting khang sinh khdng hpp ly khdng

nhung keo ddi thdi gian diiu tri benh md cdn lam vi

khuan khdng khang sinh. Trin co sd kit qua phdn

tich ty ll mang cdc yeu td ddc Itic ciia vi khudn E. coli

da tiin hanh: Xac dinh dpc lire vd tinh mdn cam

khang sinh ciia vi khuan E. co/r phan lap tir Ipn con

tiiu chay.

n. DO! TUQNG VA PHUONG PHAP NGHEN CUU

1. Nguyin U|u nghiln ciiu

' Trudng D^i hpc Ndng lam Hue

^ Chi cy Thu y Thira Thien - Hue

' Sinh vien - Trudng D^i hpc Nong lam Hue

Vi khuan E. coli phdn lap tir phdn Ipn bj binh

tiiu chay trin dia ban tinh Thira Thiin Hul

Nguyin lieu dimg cho phan ting PCR (Primer, IQ

supermix. Enzyme load), do Cdng ty Biorad cung

cap. Chudt nhdt ti-dng 18-20g do Vi|n Vdc-xin Ch^

phdm Sinh hpc Nha Trang cung cap. Gidy tdm khang

sinh do Cdng ty Nam Khoa Thanh phd Hd Chi Minh

cung cdp. Mdi trudng vd hda chat ciia Bp mon Vi

trung - Benh viln Tnmg uong Hul; trang thilt bi ciia

Bd mdn Ky sinh Truyen nhilm - Khoa Chdn nuoi￾Thii y - Dai hpc Ndng Lam Hul.

2. Phuong phdp nghiln ciiu

a. Kiim tia kha ning mang gien dgc cua w

khuin E. coli

Tir mdu benh pham (phdn) ciia Ion sau cai siia bj

benh tieu chay, tiin hdnh bdi dudng trin mdi trudng

EMB sau 24 gid, chpn khuan lac ddc trung tiin hanh

phan img PCR ydi cdc gien nhu: STa, STb, LT, VTxBe

(Blanco et al., 1997); ti-ong dd: STa, STb: Ddc td chju

nhilt; LT: Ddc td khdng chiu nhi|t; VTx2e: Dpc t6

dung huylt

b. Xac dinh dgc luc cua vi khuin E. coli

Ld thi nghilm bao gdm cdc chung E. co/r'duong

tinh vdi mpt ti-ong cdc gien: STa, STb, LT, VTx2). Lo

ddi chiing la cac chiing E. coli am tinh vdi cdc gien

trin. Cac chung vi khuan E. coli sau khi da kilm tra

duong tinh vdi mpt trong bdn yeu td ddc Itic: STa,

STb, LT, VTx2e dupc nudi cay trin mdi trudng nudc

tiiit d 37°C. Sau 18 - 24 gid, moi chiing tilm vao phdc

mac ciia 2 chudt bach, Ulu 0,2 ml/con. Theo ddi thdi

gian va ty ll chudt chit, md kham binh tich vd Idy

52 NONG NGHlf P VA PHAT TRIEN NONG THON - KY 1 THANG 9/2011