Tinh cchế puerarin, glycitin, genistin, daidzein từ củ sắn dây bằng nhựa macroporous d101

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG

TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM

KHOA HÓA HỌC

TRẦN QUỲNH NHƢ

TINH CHẾ PUERARIN, GLYCITIN, GENISTIN, DAIDZEIN

TỪ CỦ SẮN DÂY BẰNG NHỰA MACROPOROUS D101

Ngành đào tạo: Cử nhân Hoá phân tích – Môi trƣờng

Trình độ đào tạo: Đại học

KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP

ĐÀ NẴNG, NĂM 2019

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG

TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM

KHOA HÓA HỌC

TRẦN QUỲNH NHƢ

TINH CHẾ PUERARIN, GLYCITIN, GENISTIN, DAIDZEIN

TỪ CỦ SẮN DÂY BẰNG NHỰA MACROPOROUS D101

Ngành đào tạo: Cử nhân Hoá phân tích – Môi trƣờng

Trình độ đào tạo: Đại học

KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP

Giảng viên hƣớng dẫn:

TS. BÙI XUÂN VỮNG

ĐÀ NẴNG, NĂM 2019

Khoá luận tốt nghiệp

SV: Trần Quỳnh Như 3

LỜI CẢM ƠN

Để hoàn thành khóa luận này, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Thầy TS.

Bùi Xuân Vững, đã tận tình hƣớng dẫn em trong suốt quá trình viết báo cáo tốt nghiệp.

Em chân thành cảm ơn quý Thầy, Cô trong khoa Hóa học, Trƣờng Đại Học Sƣ

Phạm- Đại học Đà Nẵng đã tận tình truyền đạt kiến thức trong những năm em học tập.

Với vốn kiến thức đƣợc tiếp thu trong quá trình học không chỉ là nền tảng cho quá

trình nghiên cứu khóa luận mà còn là hành trang quí báu để em bƣớc vào đời một cách

vững chắc và tự tin.

Cuối cùng, cho em gửi lời cảm ơn đến các Thầy Cô trong Hội đồng bảo vệ tốt

nghiệp đã dành thời gian quý báu của mình để đọc và nhận xét khóa luận của em.

Trong quá trình làm bài báo cáo khó tránh khỏi sai sót, rất mong nhận đƣợc ý kiến

đóng góp của Thầy, Cô để bài báo cáo của em đƣợc hoàn thiện hơn.

Đà Nẵng, ngày 26 tháng 4 năm 2019

Sinh viên thực hiện

Khoá luận tốt nghiệp

SV: Trần Quỳnh Như 4

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT

HPLC

High-performance liquid chromatography (Sắc ký

lỏng hiệu năng cao)

DMSO Dimethyl sulfoxit có công thức (CH3)2SO.

PTFE Polytetrafloetylen (nhựa teflon)

AOAC

Association of Official Analytical Chemists có

nghĩa là Hiệp hội các nhà hoá phân tích chính thống.

CHD Coronary heart disease (bệnh động mạch vành )

EtOH Etanol, ancol etylic

BV Thể tích cột

MeOH Metanol, ancol metylic

STD Standard có nghĩa là dung dịch chuẩn

SD Standard deviation (độ lệch chuẩn)

RSD

Relative standard deviation (độ lệch chuẩn tƣơng

đối)

LOD Giới hạn phát hiện (limit of detector)

LOQ Giới hạn định lƣợng (Limit of Quantitation)

Khoá luận tốt nghiệp

SV: Trần Quỳnh Như 5

DANH MỤC HÌNH ẢNH

Hình 1. 1. Cây sắn dây..................................................................................................12

Hình 1. 2. Màu sắc vỏ củ và thịt củ ..............................................................................13

Hình 1. 3. Lát cắt ngang ...............................................................................................13

Hình 1. 4. Hình ảnh quy trình trồng củ sắn dây (nguồn: tác giả)................................14

Hình 1. 5. Cấu trúc hoá học của isoflavonoid..............................................................15

Hình 1. 6. Cấu trúc hoá học của các aglucon ..............................................................15

Hình 1. 7. Cấu trúc hoá học của các -Glucozit..........................................................16

Hình 1. 8. Nhựa Macroporous D101............................................................................20

Hình 1. 9. Sơ đồ thể hiện sự ảnh hưởng của các lực rửa giải......................................24

Hình 1. 10. Quá trình rửa giải và tách peak của chất A và chất B ..............................24

Hình 1. 11. Sắc ký đồ của chất A và chất B..................................................................25

Hình 1. 12. Ảnh hưởng của độ chọn lọc đến hiệu quả tách peak của hai chất A và B 26

Hình 1. 13. Cách tính hệ số không đối xứng của peak. ................................................28

Hình 2. 1. Bột củ sắn dây..............................................................................................37

Hình 2. 2. Thiết bị HPLC..............................................................................................38

Hình 2. 3. Sơ đồ quy trình chiết khuấy bột sắn dây......................................................40

Hình 2. 4. Dịch chiết sau khi cô quay...........................................................................40

Hình 2. 5. Cột nhựa.......................................................................................................42

Hình 2. 6. Các phân đoạn isoflavonoid trong cồn khi được rửa giải...........................43

Hình 3. 1. Kết quả chấm bản mỏng 11 phân đoạn với hệ (I) .......................................46

Hình 3. 2. Kết quả chấm bản mòng 11 phân đoạn với hệ (II)......................................46

Hình 3. 3. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc diện tích peak vào nồng độ Puerarin ..........49

Hình 3. 4. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc diện tích peak vào nồng độ Daidzin............49

Khoá luận tốt nghiệp

SV: Trần Quỳnh Như 6

Hình 3. 5. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc diện tích peak vào nồng độ Glycitin............50

Hình 3. 6. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc diện tích peak vào nồng độ Genistin...........50

Hình 3. 7. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc diện tích peak vào nồng độ Daidzein ..........51

Hình 3. 8. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc diện tích peak vào nồng độ Glycitein..........51

Hình 3. 9. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc diện tích peak vào nồng độ Genistein .........52

Hình 3. 10. Sắc ký đồ mẫu dung dịch chuẩn Puerarin (Hệ 1)......................................55

Hình 3. 11. Sắc ký đồ mẫu cao tinh (Hệ 1)...................................................................55

Hình 3. 12. Sắc ký đồ 6 isoflavone trong mẫu dung dịch chuẩn (Hệ 2).......................56

Hình 3. 13. Sắc ký đồ mẫu dung dịch chuẩn Puerarin (Hệ 2)......................................56

Hình 3. 14. Sắc ký đồ mẫu cao tinh ( Hệ 2)..................................................................57

Hình 3. 15. Sắc ký đồ mẫu bột sắn dây (Hệ 1) .............................................................57

Hình 3. 16. Sắc ký đồ mẫu cao thô (Hệ 1)....................................................................58

Hình 3. 17. Sắc ký đồ mẫu cao tinh (Hệ 1)...................................................................58

Hình 3. 18. Sắc ký đồ mẫu bột sắn dây(Hệ 2) ..............................................................58

Hình 3. 19. Sắc ký đồ mẫu cao thô (Hệ 2)....................................................................59

Hình 3. 20. Sắc ký đồ mẫu cao tinh(Hệ 2)....................................................................59