Tạo bào tử bacillus subtilis biểu hiện streptavidin gắn kháng thể biotinyl hóa kháng virus gây bệnh

Tạo bào tử Bacillus subtilis biểu hiện streptavidin

gắn kháng thể biotinyl hóa kháng virus gây bệnh

đốm trắng ở tôm

Bùi Thu Thủy

Trường Đại học Tự nhiên, Khoa Sinh học

Luận văn ThS Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm; Mã số: 60 42 30

Người hướng dẫn: TS. Nguyễn Thị Vân Anh

Năm bảo vệ: 2011

Abstract: Tổng quan các vấn đề cần nghiên cứu: bào tử Bacillus subtilis và

biểu hiện protein ngoại lai trên bề mặt bào tử; Streptavidin; Virus gây bệnh

đốm trắng ở Tôm; Phản ứng ngưng kết miễn dịch và ứng dụng. Giới thiệu

nguyên liệu và phương pháp nghiên cứu. Trình bày một số kết quả nghiên

cứu: nhân dòng đoạn gen Streptavidin vào vector PDG364 Cotb và dung hợp

vào hệ gen B - subtilis; đánh giá mức độ biểu hiện protein dung hợp Cotb –

Streptavidin trên bề mặt bào tử B - subtilis; đánh giá mức độ liên kết của bào

tử - strep với kháng thể kháng VP28-Biotinyl: Phản ứng ngưng kết miễn dịch

thụ động kiểm tra sự có mặt của Virus gây bệnh đốm trắng trên tôm WSSV

Keywords: Sinh học thực nghiệm; Bào tử; Kháng thể; Virus; Bệnh đốm

trắng; Tôm

Content

I. Tổng quan

Bào tử Bacillus subtilis là một trong những đối tượng nghiên cứu được nhiều nhà

khoa học quan tâm nhờ tính chất bền nhiệt, không độc hại, đặc biệt nhất là các công trình

nghiên cứu về hê ̣thống biểu hiêṇ protein trên bềmăṭ của bào tử

. Hê ̣thống biểu hiện này sử

dụng một protein của lớp áo bào tử làm yếu tố dung hợp , gắn vớ

i môṭ protein ngoaị lai

nhằm biểu hiêṇ protein này trên bềmăṭ bào tử đó

. Protein ngoaị lai có

thể là m ột kháng

nguyên hay các protein làm đầu dò v .v... Những ứng duṇ g của hê ̣thống này trải rôṇ g trên

nhiều liñh vưc̣ , nổi bâṭ nhất là

tiềm năng taọ ra thế hê ̣vaccine mớ

i có

thểsử duṇ g qua

đường uống hay đường mũi , hay taọ ra các chấ t hoaṭ hóa sinh hoc̣ , chất bám dính sinh hoc̣

v.v...

Streptavidin từ

lâu đãđươc̣ con ngườ

i biết đến trong rất nhiều ứng duṇ g quan troṇ g

chủ yếu thuộc lĩnh vực Hóa sinh học và Sinh y hoc̣ , liên quan đến khả năng liên kết đăc̣ biê ̣t

của nó với biotin ho ặc với các phân tử đã được biotinyl hóa . Bào tử Bacillus subtilis biểu

hiêṇ streptavidin trên bềmăṭ (gọi tắt là bào tử-strep) hứa heṇ đem laị nhi ều tiềm năng ứng

dụng. Bào tử-strep có thể được sử dụng như một chất mang “đa dụng” nhờ khả năng gắn

với phân tử được biotinyl hóa với nhiều ưu điểm như bền nhiệt, bền với các tác nhân lý hóa