Nghiên Cứu Nhân Giống Cây Gừng Gió Zingiber Zerumbet Bằng Phương Pháp Nuôi Cấy In Vitro

i

LỜI CẢM ƠN

Sau thời gian 4 năm học tập tại Trƣờng Đại học Lâm nghiệp Việt Nam và

tham gia thí nghiệm và thực hành tại Viện Công nghệ sinh học, đƣợc rèn luyện

cùng thầy, cô và các bạn, tôi đã tiếp thu đƣợc nhiều vốn kiến thức chuyên ngành

cũng nhƣ cuộc sống vô cùng quý giá. Nhằm nâng cao trình độ, kỹ năng làm việc

cũng nhƣ hoàn thành chƣơng trình đại học, thông qua sự đồng ý của Ban lãnh

đạo Viện Công nghệ sinh học Lâm nghiệp, tôi đã tiến hành đề tài khóa luận tốt

nghiệp: Nghiên cứu nhân giống loài Gừng gió (Zingiber zerumbet) bằng

phƣơng pháp nuôi cấy in vitro.

Trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận văn tốt

nghiệp này, tôi đã nhận đƣợc sự quan tâm giúp đỡ tận tình của các thầy, cô, nhà

trƣờng và đặc biệt là các thầy cô trong Viện Công nghệ sinh học.

Cho phép tôi gửi lời cảm ơn sâu sắc đến các thầy, cô. Đặc biệt em xin cảm

ơn PGS.TS. Nguyễn Văn Việt đã tận tình giúp đỡ và chỉ bảo không những kiến

thức mà cả kinh nghiệm cuộc sống.

Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến ThS. Nguyễn Thị Huyền và KS.

Đoàn Thị Thu Hƣơng đã tận tình hƣớng dẫn, truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm

cho tôi trong suốt quá trình thực hiện luận văn tốt nghiệp này..

Cuối cùng, em xin cảm ơn ngƣời thân trong gia đình và bạn bè đã ủng hộ,

tạo mọi điều kiện về vật chất và tinh thần cho em suốt thời gian học Đại học.

Vì vốn kiến thức bản thân còn hạn chế, trong quá trình thực hiện, hoàn

thiện chuyên đề này không tránh khỏi những sai sót, rất mong nhận đƣợc những

ý kiến đóng góp từ thầy cô để tôi có thêm kinh nghiệm cho nghề nghiệp sau này.

Một lần nữa tôi xin chân thành cảm ơn !

Hà Nội,ngày 20/06/2018

Sinh viên thực hiện

Đinh Văn Hùng

ii

MỤC LỤC

LỜI CẢM ƠN ....................................................................................................i

DANH MỤC VIẾT TẮT .................................................................................iv

DANH MỤC CÁC BẢNG................................................................................ v

DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ..........................................................................vi

DANH MỤC CÁC HÌNH...............................................................................vii

ĐẶT VẤN ĐỀ................................................................................................... 1

CHƢƠNG I: TỔNG QUAN ............................................................................. 2

1.1.Tìm hiểu chung về cây Gừng gió ............................................................... 2

1.1.1. Mô tả chi tiết ........................................................................................... 3

1.1.2. Phân bố.................................................................................................... 4

1.1.3. Công dụng của cây Gừng gió.................................................................. 5

1.2.Tống quan về nuôi cấy mô – tế bào thực vật .............................................. 5

1.2.1. Khái niệm về nuôi cấy mô – tế bào thực vật........................................... 5

1.2.2. Lịch sử phát triển của kỹ thuật nuôi cấy mô – tế bào thực vật ............... 6

1.2.3. Tầm quan trọng của kỹ thuật nuôi cấy mô – tế bào thực vật.................. 6

1.2.4. Cơ sở khoa học của nuôi cấy mô – tế bào thực vật................................. 7

1.2.3. Các bƣớc nhân giống trong môi trƣờng in vitro ..................................... 9

1.2.4. Các yếu tố ảnh hƣởng đến quá trình nuôi cấy mô – tế bào thực vật..... 12

1.2.5. Môi trƣờng nuôi cấy.............................................................................. 14

1.2.6. Ý nghĩa và ƣu, nhƣợc điểm của nuôi cấy mô - tế bào trong công tác

giống cây trồng................................................................................................ 20

1.3. Một số công trình nghiên cứu về cây Gừng gió đã đƣợc công bố........... 21

1.3.1. Công trình về cây dƣợc liệu .................................................................. 21

1.3.2. Các công trình nghiên cứu về cây họ Gừng.......................................... 22

CHƢƠNG II: MỤC TIÊU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN

CỨU ................................................................................................................ 24

2.1. Mục tiêu nghiên cứu................................................................................. 24

2.1.1. Mục tiêu chung...................................................................................... 24

2.1.2. Mục tiêu cụ thể...................................................................................... 24

iii

2.2. Nội dung nghiên cứu................................................................................ 24

2.3 Vật liệu, địa điểm và điều kiện bố trí phòng thí nghiệm .......................... 24

2.3.1. Vật liệu nghiên cứu ............................................................................... 24

2.3.2. Địa điểm thực hiện................................................................................ 25

2.3.3. Điều kiện bố trí thí nghiệm ................................................................... 25

2.3.4. Phạm vi nghiên cứu............................................................................... 25

2.4. Phƣơng pháp nghiên cứu.......................................................................... 25

2.5. Phƣơng pháp thu thập và xử lý số liệu..................................................... 29

CHƢƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN....................... 30

3.1. Kết quả nghiên cứu ảnh hƣởng của thời gian khử trùng đến khả năng tạo

mẫu sạch.......................................................................................................... 30

3.2. Nghiên cứu ảnh hƣởng của môi trƣờng dinh dƣỡng đến khả năng phát

sinh hình thái mẫu in vitro . ............................................................................ 32

3.3. Nghiên cứu ảnh hƣởng của loại và nồng độ các chất điều hòa sinh trƣởng

đến khả năng nhân nhanh chồi........................................................................ 34

3.4. Nghiên cứu ảnh hƣởng của nồng độ NAA đến khả năng ra rễ của mẫu. 38

CHƢƠNG IV KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ KIẾN NGHỊ............................... 41

4.1.Kết luận ..................................................................................................... 41

4.2. Tồn tại ...................................................................................................... 41

4.3. Kiến nghị.................................................................................................. 41

TÀI LIỆU THAM KHẢO

iv

DANH MỤC VIẾT TẮT

KÝ HIỆU GIẢI THÍCH

CTTN Công thức thí nghiệm

Cs Cộng sự

ĐHST Điều hòa sinh trƣởng

BAP 6 - Benzylaminiopurine

Kinetin N – (2 – furfurylamino) – 1 – H- purine – 6 - amine

NAA α – Naphthalene acetic acid

MS Muashige & Skoog (1962)

B5 Gamborg và Cs

dd Dung dịch

TB Trung bình

v

DANH MỤC CÁC BẢNG

Bảng 2.1. Ảnh hƣởng thời gian khử trùng đến khả năng tạo mẫu sạch......... 26

Bảng 2.2. Ảnh hƣởng của môi trƣờng nuôi cấy đến khả năng tạo mẫu tái sinh....27

Bảng 2.3. Bảng đánh giá ảnh hƣởng của của loại và nồng độ các chất điều hòa

sinh trƣởng đến khả năng nhân nhanh chồi. ................................................... 28

Bảng 2.4. Ảnh hƣởng ảnh hƣởng của các chất điều hòa sinh trƣởng đến khả

năng ra rễ của mẫu. ......................................................................................... 29

Bảng 3.1. Ảnh hƣởng của thời gian khử trùng đến khả năng tạo mẫu sạch ... 30

Bảng 3.2. Ảnh hƣởng của môi trƣờng dinh dƣỡng đến khả năng phát sinh hình

thái mẫu invtro. ............................................................................................... 32

Bảng 3.3. Ảnh hƣởng của của loại và nồng độ các chất điều hòa sinh trƣởng

đến khả năng nhân nhanh chồi........................................................................ 35

Bảng 3.4. Ảnh hƣởng ảnh hƣởng của NAA đến khả năng ra rễ của mẫu ...... 38

vi

DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ

Biểu đồ 3.1. Ảnh hƣởng của thời gian khử trùng đến khả năng tạo mẫu sạch30

Biểu đồ 3.2. Ảnh hƣởng của môi trƣờng dinh dƣởng đến quá trình tạo mẫu tái

sinh. ................................................................................................................. 33

Biểu đồ 3.3. Ảnh hƣởng của loại và nồng độ các chất điều hòa sinh trƣởng

đến hệ số nhân nhanh chồi ............................................................................. 35

Biểu đồ 3.4. Ảnh hƣởng của loại và nồng độ các chất điều hòa sinh trƣởng

đến hệ số nhân nhanh chồi ............................................................................. 36

Biểu đồ 3.5. Ảnh hƣởng của NAA đến chiều dài ra rễ của mẫu. ................... 38

Biểu đồ 3.6. Ảnh hƣởng của NAA đến số lƣợng rễ của mẫu. ........................ 39