Nghiên cứu đặc điểm sinh học và trinh tự đoạn gen matK/ITS của một số mẫu cây đậu nho nhe (Vigna umbellata)

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu và Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM

NGUYỄN THỊ THANH

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC

VÀ TRÌNH TỰ ĐOẠN GEN matK/ITS

CỦA MỘT SỐ MẪU CÂY ĐẬU NHO NHE (Vigna umbellata)

LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC

Thái Nguyên, năm 2019

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu và Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM

NGUYỄN THỊ THANH

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC

VÀ TRÌNH TỰ ĐOẠN GEN matK/ITS

CỦA MỘT SỐ MẪU CÂY ĐẬU NHO NHE (Vigna umbellata)

Ngành: Sinh học thực nghiệm

Mã số: 8 42 01 14

LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC

Người hướng dẫn khoa học: TS. Nguyễn Hữu Quân

Thái Nguyên, năm 2019

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu và Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi. Mọi trích dẫn trong

luận văn đều ghi rõ nguồn gốc. Các số liệu, kết quả nghiên cứu trong luận văn là

trung thực và chưa được ai công bố.

Thái Nguyên, tháng 6 năm 2019

Tác giả luận văn

Nguyễn Thị Thanh

XÁC NHẬN

CỦA KHOA CHUYÊN MÔN

XÁC NHẬN

CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN

TS. Nguyễn Hữu Quân

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu và Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn

LỜI CẢM ƠN

Lời đầu tiên em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc tới

TS. Nguyễn Hữu Quân, giảng viên Khoa Sinh học, Trường Đại học Sư phạm -

Đại học Thái Nguyên đã tận tình hướng dẫn, chỉ bảo và tạo mọi điều kiện giúp

đỡ em trong quá trình nghiên cứu và hoàn thành luận văn.

Em xin chân thành cảm ơn sự giúp đỡ của cô Trần Thị Hồng, cô Cao Thị

Phương Thảo và các thầy cô kỹ thuật viên phòng thí nghiệm của Khoa Sinh học,

Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên trong quá trình làm thí

nghiệm.

Em xin chân thành cảm ơn các thầy cô trong Bộ môn Sinh học hiện đại và

Giáo dục sinh học, Bộ phận Sau đại học thuộc Phòng Đào tạo, Trường Đại học

Sư phạm - Đại học Thái Nguyên đã tạo mọi điều kiện thuận lợi cho em trong

quá trình học tập và hoàn thành luận văn.

Em xin cảm ơn sự hỗ trợ kinh phí từ đề tài bảo tồn và lưu giữ quỹ gen cấp

Bộ năm 2018 “Nghiên cứu bảo tồn nguồn gen nhóm cây đậu đỗ địa phương thu

thập từ các tỉnh thuộc miền Bắc Việt Nam”, mã số B2018-TNA-09-GEN.

Em xin bày tỏ lời biết ơn đến gia đình, bạn bè đã động viên, khuyến khích

và giúp đỡ em trong tiến trình học tập và hoàn thành luận văn.

Thái Nguyên, tháng 6 năm 2019

Tác giả luận văn

Nguyễn Thị Thanh

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu và Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn

MỤC LỤC

LỜI CAM ĐOAN ................................................................................................. i

LỜI CẢM ƠN......................................................................................................ii

MỤC LỤC...........................................................................................................iii

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT................................................................ iv

DANH MỤC CÁC BẢNG .................................................................................. v

DANH MỤC CÁC HÌNH .................................................................................. vi

MỞ ĐẦU .............................................................................................................. 1

1. Đặt vấn đề.......................................................................................................... 1

2. Mục tiêu nghiên cứu.......................................................................................... 2

3. Nội dung nghiên cứu......................................................................................... 2

Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU ................................................................ 3

1.1. Sơ lược cây đậu Nho nhe ............................................................................... 3

1.1.1. Hệ thống phân loại ...................................................................................... 3

1.1.2. Đặc điểm hình thái ...................................................................................... 5

1.1.3. Giá trị dinh dưỡng và công dụng ................................................................ 6

1.1.4. Giá trị sử dụng............................................................................................. 8

1.2. Nghiên cứu sử dụng mã vạch DNA ............................................................... 9

1.3. Tình hình nghiên cứu nhóm cây họ Đậu...................................................... 11

1.3.1. Tình hình nghiên cứu trên thế giới............................................................ 11

1.3.2. Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam ............................................................ 14

Chương 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP................................................. 18

2.1. Vật liệu, hóa chất, thiết bị ............................................................................ 18

2.1.1. Vật liệu ...................................................................................................... 18

2.1.2. Hóa chất..................................................................................................... 18

2.1.3. Thiết bị ...................................................................................................... 19

2.1.4. Địa điểm nghiên cứu ................................................................................. 19

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu và Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn

2.2. Phương pháp nghiên cứu.............................................................................. 19

2.2.1. Phương pháp nghiên cứu đặc điểm hình thái, giải phẫu........................... 19

2.2.1.1.Nghiên cứu hình thái............................................................................... 19

2.2.1.2. Phương pháp giải phẫu thực vật............................................................. 20

2.2.2. Phương pháp hóa sinh ............................................................................... 20

2.2.2.1.Xác định hoạt tính α-amilase .................................................................. 20

2.2.2.2 Xác định hoạt tính protease..................................................................... 22

2.2.2.3. Định lượng protein tan ........................................................................... 23

2.2.2.4. Phương pháp xác định hàm lượng isoflavon ......................................... 24

2.2.2.5. Xác định hàm lượng lipit ....................................................................... 24

2.2.3. Phương pháp sinh học phân tử.................................................................. 25

2.2.4. Phương pháp xử lý và phân tích kết quả................................................... 27

Chương 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ............................................................ 28

3.1. Ðặc điểm hình thái ngoài và giải phẫu của các giống đậu Nho nhe ............ 28

3.1.1. Ðặc điểm hình thái ngoài của các giống đậu Nho nhe.............................. 28

3.1.2 Hình thái giải phẫu của các giống đậu Nho nhe ........................................ 36

3.1.2.1. Hình thái giải phẫu của rễ ...................................................................... 36

3.1.2.2 Hình thái giải phẫu của thân.................................................................... 37

3.1.2.3. Hình thái giải phẫu của lá....................................................................... 38

3.2. Hoạt tính α- amylase từ mầm hạt đậu Nho nhe ........................................... 39

3.3. Hoạt tính enzyme protease từ mầm hạt đậu Nho nhe .................................. 41

3.4. Định lượng protein tan ................................................................................. 42

3.5. Hàm lượng isoflavone từ mầm hạt đậu Nho nhe ......................................... 43

3.6. Hàm lượng lipit trong các mẫu đậu Nho nhe............................................... 44

3.7. Đặc điểm của vùng gen ITS phân lập từ mẫu đậu Nho nhe ........................ 45

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .......................................................................... 50

KẾT LUẬN......................................................................................................... 50

KIẾN NGHỊ ........................................................................................................ 50

THÀNH TÍCH NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ................................................ 51