Kết quả gây miễn dịch động vật thí nghiệm bằ̀ng quyế́t định kháng nguyên Cyfra21-1

Lê Đình Chắc và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 85(09)/2: 17 - 19

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 17 http://www.lrc-tnu.edu.vn

KẾT QUẢ GÂY MIỄN DỊCH ĐỘ NG VẬ T THÍ NGHIỆ M BẰ NG

QUYẾT ĐỊNH KHÁ NG NGUYÊN CYFRA21-1

Lê Đình Chắc

1

, Nguyễn Thị Thủy

2

, Lê Quang Huấn

2

1

Trường ĐH Hồng Đứ c - Thanh Hóa

2Việ n Công nghệ sinh họ c

TÓM TẮT

Ung thƣ phổi là mộ t trong nhƣ̃ng căn bệnh hiểm nghèo do sƣ̣ tăng sinh không bình thƣờng củ a tế

bào và có tỉ lệ tử vong cao . Thƣ̣ c tế đã có nhiều các chỉ thị kháng nguyên đƣợ c sƣ̉ dụ ng để chẩn

đoán căn bệnh nguy hiểm này , tuy nhiên kháng nguyên Cyfra 21-1 là chỉ thị đặc hiệu cho ung thƣ

phổi dạng tế bào không nhỏ (non small cell carcinoma). Để tạo đƣợ c kháng thể tái tổ hợ p đặ c hiệu

kháng nguyên trên, chúng tôi đã tiến hành thu nhận kháng nguyên Cyfra 21-1 tƣ̀ bệnh phẩm và tiến

hành gây miễn dịch động vật thí nghiệm bằng khán g nguyên thu đƣợ c . Kết quả gây miễn dịch đã

thành công và thu đƣợc đáp ứng miễn dịch rất cao ở động vật thí nghiệm , điều này hoàn toàn phù

hợ p với lý thuyết và làm cơ sở cho các nghiên cƣ́u tiếp theo.

Từ khóa: miễn dịch động vật, kháng nguyên, Cyfra21-1

ĐẶT VẤN ĐỀ*

Ung thƣ phổi (UTP) là một trong nhƣ̃ng căn bệnh

hiểm nghèo do sƣ̣ tăng sinh không bình thƣờng

của tế bào, chiếm ƣu thế ở nam giới , mà chủ yếu

là lứa tuổi 50-70, đặ c biệt là những ngƣời đã hoặc

đang hút thuốc lá (80%), đây là mộ t trong nhƣ̃ng

căn bệnh có tỉ lệ tử vong lớn nhất trong các bệnh

ung thƣ (chiếm 31%) [5]. Vì vậy, việc phát hiện

sớm ung thƣ phổi có ý nghĩa sống còn với bệnh

nhân, bởi khi phát hiện đƣợ c ung thƣ phổi ở giai

đoạn sớm có thể đƣa ra biện pháp điều trị hợp lý, có

khả năng chữa khỏi bệnh . Nếu ở giai đoạn muộn

hơn khi ung thƣ đã di căn thì thực sự là một khó

khăn trong điều trị do vậy tính mạng củ a bệnh nhân

khó có thể tồn tại đƣợ. c

Trong thƣ̣ c tế, ung thƣ phổi đã có nhiều nhỉ thị có

thể sƣ̉ dụ ng để phát hiện (Carcinoembryonic

antigen (CEA), cytokeratin 19cyfra21-1, neuron

specific enolase (NES), CA125…) [1,2,4]. Tuy

nhiên kháng nguyên Cyfra 21-1 là một chỉ thị

điển hình cho khoảng 80% bệnh UTP và tăng

nồng độ nhanh chóng ngay khi tế bào biểu mô

phổi tăng sinh bất thƣờng, nếu phát hiện đƣợc sự

có mặt của Cyfra 21-1 sẽ góp phần chẩn đoán

sớm căn bệnh ung thƣ phổi . Trong bài viết này ,

chúng tôi trình bày kết quả gây miễn dịch động

vật thí nghiệm bằng quyết định kháng nguyên

cyfra21-1 thu đƣợ c làm tiền đề cho các nghiên

cƣ́u tiếp theo.

*

NGUYÊN LIỆU, PHƢƠNG PHÁP VÀ QUY

TRÌNH NGHIÊN CỨU

Nguyên liệu

- Kháng nguyên cyfra 21.1 tái tổ hợp do phòng

Công nghệ tế bào độ ng vật cung cấp.

- Gà lơgor do viện chăn nuôi cung cấp.

- Các hóa chất và tinh sạch sản phẩm đều đƣợc

mua tƣ̀ các hãng có uy tín.

Phương pháp

- Gây miễn dịch động vật được sử dụng theo

phương pháp của Westerfeld (2005) với kháng

nguyên tái tổ hợ p Cyfra21-1.

- Phương pháp kiểm tra đáp ứng miễn dịch bằng

ELISA

Các bƣớc trong ELISA . ( 1) Phủ đĩa bằng kháng

thể (2) Thêm mẫu (huyết thanh gà đã gây miễn

dịch) cần xác định kháng nguyên . Kháng nguyên

(nếu có) sẽ gắn với kháng thể ; (3) kháng thể dùng

để phát hiện đƣợc thêm vào và kết hợp với kháng

nguyên; (4) Thêm kháng thể thứ cấp liên kết với

enzyme. Kháng thể thứ cấp s ẽ gắn với kháng thể

dùng để phát hiện ; (5) Thêm cơ chất . Enzym sẽ

làm biến đổi cơ chất và phát tín hiệu phát hiện và

đo đƣợ c. [3]

Quy trình gây miễn dịch ở gà

Quyết định kháng nguyên Cyfra 21-1 đã tinh sạ ch

đƣợ c trộ n với tá dƣợ c (lần đầu dung dịch kháng

nguyên đƣợ c trộ n với chất bổ trợ hoàn toàn

Freund (complete) và các lần sau với chất bổ trợ