Định lượng một số hợp chất Polyphenol và sự biểu hiện của gen mã hóa Enzyme tham gia tổng hợp Polyphenol ở chè

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu và Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC

––––––––––––––––––––

NGUYỄN THANH HUYỀN

ĐỊNH LƯỢNG MỘT SỐ HỢP CHẤT POLYPHENOL

VÀ SỰ BIỂU HIỆN CỦA GEN MÃ HÓA ENZYME THAM

GIA TỔNG HỢP POLYPHENOL Ở CHÈ

LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG

THÁI NGUYÊN - 2019

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu và Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC

––––––––––––––––––––

NGUYỄN THANH HUYỀN

ĐỊNH LƯỢNG MỘT SỐ HỢP CHẤT POLYPHENOL

VÀ SỰ BIỂU HIỆN CỦA GEN MÃ HÓA ENZYME THAM

GIA TỔNG HỢP POLYPHENOL Ở CHÈ

Chuyên ngành: Công nghệ sinh học

Mã số: 84 20 201

LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG

Người hướng dẫn khoa học: TS. Hoàng Thị Thu Yến

THÁI NGUYÊN - 2019

i

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu và Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan các số liệu và kết quả trình bày trong luận văn là

trung thực và chưa được ai công bố trong bất kỳ công trình nào. Mọi kết quả

thu được không chỉnh sửa, sao hoặc chép từ các nghiên cứu khác. Mọi trích

dẫn trong luận văn đều ghi rõ nguồn gốc.

Tác giả

ii

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu và Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn

LỜI CẢM ƠN

Tôi xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS. Hoàng Thị Thu Yến đã định

hướng khoa học, tận tình hướng dẫn, giúp đỡ và tạo mọi điều kiện tốt nhất

trong suốt quá trình tôi tiến hành nghiên cứu và hoàn thành luận văn này.

Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô và cán bộ Khoa Công nghệ Sinh

học, Trường Đại học Khoa học - Đại học Thái Nguyên đã tận tình dạy dỗ, chỉ

bảo và truyền cho tôi niềm đam mê nghiên cứu khoa học.

Cuối cùng, tôi xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè, đồng nghiệp đã

nhiệt tình động viên cho tôi thêm động lực hoàn thành tốt quá trình học tập và

nghiên cứu khoa học.

Đề tài luận văn nhận được sự hỗ trợ kinh phí từ đề tài cấp bộ mã số

B2016-TNA-24.

Thái Nguyên, tháng 10 năm 2019

Tác giả

Nguyễn Thanh Huyền

iii

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu và Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn

MỤC LỤC

LỜI CAM ĐOAN ..........................................................................................i

LỜI CẢM ƠN...............................................................................................ii

MỤC LỤC ...................................................................................................iii

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT.............................................................. v

DANH MỤC CÁC BẢNG...........................................................................vi

DANH MỤC CÁC HÌNH...........................................................................vii

MỞ ĐẦU....................................................................................................... 1

1. Đặt vấn đề .................................................................................................. 1

2. Mục tiêu nghiên cứu................................................................................... 2

3. Nội dung nghiên cứu .................................................................................. 3

CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU...................................................... 4

1.1. Tổng quan về cây chè .............................................................................. 4

1.1.1. Nguồn gốc và phân loại ........................................................................ 4

1.1.2. Đặc điểm hình thái................................................................................ 5

1.1.3. Thành phần hóa học của chè................................................................. 6

1.1.4. Tác dụng sinh học của cây chè ............................................................. 7

1.2. Polyphenol ở chè ................................................................................... 10

1.2.1. Thành phần polyphenol ở chè............................................................. 10

1.2.2. Con đường sinh tổng hợp polyphenol ở chè........................................ 15

1.2.3.Thành phần catechins ở chè …………………………………..……....16

1.2.4. Con đường sinh tổng hợp catechins ở chè ………………………...... 19

1.3. Tình hình nghiên cứu polyphenol ở chè………......................................21

1.3.1 Tình hình nghiên cứu polyphenol chè trên thế giới.............................. 22

1.3.2 Tình hình nghiên cứu polyphenol chè ở Việt Nam............................... 24

Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU................. 26

2.1. Vật liệu nghiên cứu ............................................................................... 26

2.1.1. Nguyên liệu ........................................................................................ 26

iv

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu và Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn

2.1.2. Hóa chất, thiết bị ................................................................................ 26

2.2. Địa điểm và thời gian ............................................................................ 28

2.3. Phương pháp nghiên cứu ....................................................................... 28

2.3.1. Phương pháp thu mẫu lá chè............................................................... 28

2.3.2. Phương pháp định lượng một số hợp chất polyphenol ở chè bằng

HPLC ................................................................................................. 28

2.3.3. Phương pháp sinh học phân tử............................................................ 32

CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ............................................. 36

3.1. Định lượng một số hợp chất polyphenol ở chè bằng HPLC ................... 36

3.2. Định lượng sự biểu hiện của gen mã hóa enzyme tham gia tổng hợp

polyphenol ở chè ................................................................................ 38

3.3. Mối liên quan giữa hàm lượng catechins với sự biểu hiện của gen LAR

và ANR ở chè trung du xanh và chè trung du tím................................ 45

KẾT LUẬN................................................................................................. 48

KIẾN NGHỊ................................................................................................ 48

TÀI LIỆU THAM KHẢO.......................................................................... 49